Flujo génico diferencial en hibridos Brassica napus L. x B. rapa L.
Torres Carbonell, Francisco Javier; Presotto, Alejandro Daniel; Ureta, Maria Soledad
En una población de B. rapa del partido de Balcarce que se encontraba lindante a un cultivar invernal y otro primaveral de colza (B. napus) resistente a imidazolinonas, se encontraron híbridos cultivo-maleza. Debido a que el requerimiento de vernalización es heredable, el objetivo fue determinar la proporción de híbridos que provenían del cruzamiento con cada cultivar,para establecer el riesgo de introgresión de la resistencia a imidazolinonas en la maleza. Se realizó un ensayo a campo en dos fechas contrastantes: una temprana (VRN1) y una tardía (VRN2), para evaluar los requerimientos de frío necesarios para que florezcan los diferentes biotipos. En un diseño completamente aleatorizado, se incluyó el cv. invernal Gospel (GOS), el primaveral e IMI- resistente Nexera 8450 (NEX) e híbridos B. napus x B. rapa (F1). En el ensayo VRN1 todos los individuos alcanzaron la etapa reproductiva. Los días a antesis para ambos cultivares fueron significativamente diferentes (p<0,05), mientras que los F1 presentaron un promedio de días intermedio entre GOS y NEX. En el ensayoVRN2 todas las plantas NEX florecieron; el 98,1% de los F1 alcanzaron la etapa reproductiva, y ningún individuo del biotipo GOS floreció debido a que no se cubrieron los requerimientos de frío necesarios. En conclusión, el flujo génico hacia B. rapa fue significativamente superior desde el cv. NEX. En tales condiciones, y ante una selección continua por herbicidas de esta familia, existe un riesgo potencial de persistencia de la resistencia en el ambiente.
La evolución de las malezas y su impacto en los sistemas agrícolas actuales
Pandolfo, Claudio Ezequiel; Ureta, Maria Soledad; Presotto, Alejandro Daniel
Las malezas son plantas adaptadas a los ambientes agrícolas que interfieren directa o indirectamente con la producción de cultivos, causando importantes pérdidas económicas en todo el mundo. Desde su advenimiento, la agricultura ha creado nuevos nichos ecológicos en ambientes fuertemente disturbados, desplazando la flora nativa y facilitando el contacto entre especies geográficamente separadas. Esto condujo a la evolución de plantas adaptadas a ambientes profundamente modificados. En numerosos casos las malezas tuvieron una evolución paralela a la de los cultivos, con quienes incluso comparten progenitores. Las complejas relaciones entre las especies domesticadas, sus malezas asociadas y los parientes silvestres involucran procesos de intercambio genético en todos los sentidos. La hibridación entre especies emparentadas es un mecanismo frecuentemente asociado a la generación de variabilidad para el desarrollo de las principales especies cultivadas. Este proceso también ha conducido a la emergencia de nuevas especies invasoras y al aumento de la agresividad de algunas malezas. En otros casos, el proceso inverso a la domesticación, denominado dedomesticación, ha conducido a la aparición de malezas ferales. En los últimos tiempos, el control químico de malezas ha sido la práctica de manejo predominante, pero la creciente aparición de biotipos resistentes amenaza su efectividad. Los herbicidas imponen una extrema presión de selección, dado que están diseñados para remover el 90-99% de la población de malezas. Como resultado, las plantas han evolucionado resistencia a los herbicidas usados comúnmente, y en la actualidad existen más de 251 especies resistentes a herbicidas.En la presente conferencia se abordarán estudios de caso sobre la evolución de malezas, realizados por el grupo de investigación de las cátedras de Producción Vegetal Extensiva y Genética Básica y Aplicada, del Departamento de Agronomía (UNS). Como ejemplo de maleza surgida por presión de selección se expondrá el caso del nabon (Raphanus sativus) resistente a herbicidas inhibidores de la enzima AHAS. Con respecto al flujo génico e hibridación cultivo-silvestre se utilizará como modelo al girasol silvestre (Helianthus annuus) y al nabo (Brassica rapa). Como ejemplo de feralidad se mencionará el escape de colza (Brassica napus) con resistencia transgénica a glifosato.Los trabajos llevados a cabo por nuestro grupo de investigación han demostrado la rápida evolución de biotipos de R. sativus con resistencia cruzada a herbicidas inhibidores de la enzima AHAS. La secuenciación en el gen de esta enzima confirmó un cambio puntual de aminoácido en las accesiones resistentes. La elevada presión de selección en los lotes en los cuales se originó el problema, sumada a la falta de rotaciones de cultivos y herbicidas llevaron a la dispersión de estos biotipos en todo el sudeste de la provincia de Buenos Aires. El flujo génico entre girasol cultivado y silvestre y entre poblaciones de B. rapa y el cultivo de colza fue confirmado mediante distintos métodos como la morfología, la fertilidad masculina, el contenido de ADN y la resistencia a herbicidas, entre otros. El riesgo de impacto ambiental inherente al empleo de variedades de ambos cultivos con resistencia a herbicidas es real, aunque la baja fertilidad de los híbridos podría atenuar el efecto y reducir la dispersión de estos biotipos. Por otra parte, un biotipo agrestal de H. annuus ha demostrado una alta capacidad de competencia con los cultivos. Este biotipo presenta evidencias de hibridación con el girasol cultivado, que habrían favorecido su adaptación a los ambientes agrícolas y aumentado su invasividad. Por último, se detectaron poblaciones naturales de B. napus y B. rapa con resistencia transgénica a glifosato. Este descubrimiento podría sugerir que el carácter provino de cultivos de colza transgénica realizados de manera informal en el país o de individuos ingresados como contaminante de semilla, e involucraría procesos de endo y exoferalidad. La presencia de estas poblaciones presenta un panorama complejo que involucra aspectos de impacto ambiental por la liberación en ambientes naturales del transgen.Estos casos son sólo una muestra de la capacidad adaptativa de las malezas y de cómo la rápida evolución en estas especies presenta un constante desafío a la agricultura moderna.
La comunicación como puente para compartir y construir conocimientos entre ciencia y sociedad
Marcos, Maria Soledad
En los años ’70 distintos enfoques latinoamericanos relacionados a la educación y la comunicación tuvieron un papel destacado en la conformación de procesos y movimientos sociales interesados en transformar la realidad. Transformación que perseguía un desarrollo sustentable centrado en las necesidades y expectativas propias de un territorio sumamente diverso, con múltiples problemáticas y potencialidades, todas ellas diferentes a las de los países del Hemisferio Norte. La mayor parte de estas iniciativas se generaron y practicaron durante mucho tiempo fuera de la academia, en contextos de educación rural informal, sin embargo la Universidad de Tucumán fue pionera en incorporar una de estas propuestas a su oferta de posgrado con la puesta en marcha de dos ciclos de la Especialización en Comunicación para el Desarrollo, hacia fines de los ’90 y principios de nuevo milenio.El enfoque de Comunicación para el Desarrollo, con Manuel Calvelo Ríos como uno de sus principales referentes, produjo una de las más extensas experiencias en el campo de la comunicación rural. A lo largo de cuatro décadas, se formaron numerosos recursos humanos en esta área y se diseñaron estrategias y materiales orientados a la información, educación y capacitación, basados en un modelo de comunicación original y puestos a prueba en una gran cantidad de comunidades campesinas en países como Perú, México, Chile, Cuba, Honduras, Nicaragua, Argentina, Bolivia, Paraguay, entre otros. Solamente en Perú, más de medio millón de personas participaron de los cursos de capacitación producidos bajo la forma de Paquetes Pedagógicos Multimediales, dentro de los proyectos FAO coordinados por Calvelo.Como parte de uno de los equipos que llevó adelante parte de esas experiencias en Argentina, uno de los desafíos principales de mi trabajo está en emplear las herramientas de la comunicación para lograr un mayor acercamiento y articulación entre ciencia y sociedad, a través de la generación de espacios de intercambio y construcción de conocimientos entre interlocutores diversos: arqueólogos, miembros de las comunidades, instituciones, organizaciones sociales, ámbitos educativos formales e informales. El diseño de cursos de capacitación, la elaboración de instancias metodológicas participativas y la producción de recursos didácticos atendiendo a las características de los destinatarios, son algunas de estas herramientas que ya se están poniendo en práctica en las acciones de vinculación que se realizan en el marco de los proyectos de investigación arqueológicos y otros proyectos relacionados a la extensión universitaria, dentro del Instituto Superior de Estudios Sociales (ISES, CONICET, UNT) y el Instituto de Arqueología y Museo de la Fac. de Cs. Nat. e I.M.L de la UNT. Entre los logros obtenidos hasta el momento destacan la integración de múltiples voces en los procesos de construcción de conocimientos y la apertura de nuevos espacios de interacción y participación entre arqueólogos y comunidades, con objetivos que, lejos de ser impuestos por los investigadores, responden a las necesidades y demandas identificadas por las personas que habitan en los territorios donde trabajamos.
Genotoxicidad de agroquímicos en la provincia de Córdoba, Argentina: Uso de Cipermetrina, Clorpirifós y Glifosato y su relación con el daño en el material genético
Vilchez, Maria Laura; Mañas, Fernando Javier; Aiassa, Delia Elba
Existen razones sumamente importantes para justificar la preocupación por la exposición del hombre a los agentes que causan daño en el material genético. El incremento en el grado de mutación de las células germinales (óvulos, espermatozoides y sus precursores) puede provocar un aumento en la incidencia de enfermedades genéticas en futuras generaciones. Por otro lado, existe una estrecha relación entre la inestabilidad del genoma de células somáticas con el cáncer y las enfermedades degenerativas crónicas. Por cuanto, las investigaciones relacionadas con la genotoxicidad adquieren cada día mayor importancia a nivel mundial. Esta obra pretende poner a disposición de los lectores del área de la salud y demás interesados en esta problemática, las características de algunos de los plaguicidas más utilizados en la Provincia de Córdoba, Glifosato, Clorpirifós y Cipermetrina y su potencial genotóxico a través del ensayo Cometa, método sencillo, rápido y de alta sensibilidad para detectar niveles bajos de daño al ADN en células individuales.
Un nuevo Dasypodidae (Mammalia, Xenarthra) del Oligoceno temprano de Gran Barranca (Chubut, Argentina)
Ciancio, Martin Ricardo; Carlini, Alfredo Armando
Damos a conocer un nuevo Euphractini (Cingulata, Dasypodidae) hallado en sedimentos oligocenos de "La Cantera" (Gran Barranca, lago Colhue Huapi), portadores de una fauna única que representa un lapso post-Tinguiririquense a pre-Deseadense. Los sedimentos corresponden a depósitos tobáceos que constituyen el Miembro Puesto Almendra superior (Formación Sarmiento), datados en ca. 30,7 Ma (Oligoceno temprano). El material (AR-10-73) corresponde a un fragmento de coraza dorsal (más numerosos osteodermos sueltos asociados) que mide 9 cm de largo, y preserva 2 hileras de bandas móviles y 10 del escudo pélvico. De acuerdo a las características de los osteodermos, el espécimen corresponde a un Euphractini pequeño, de tamaño similar al de Zaedyus pichiy, que asignamos a una nueva especie de Parutaetus Ameghino, 1902. Los osteodermos fijos son pequeños, con una figura principal alargada, en forma de lágrima (invertida, más amplia proximalmente). Presentan usualmente un par de figuras anteriores, un par de figuras anterolaterales pequeñas (que forman una figura compuesta entre osteodermos adyacentes) y un par de figuras postero-laterales (más alargadas). Poseen numerosos forámenes pilíferos pequeños, restringidos al borde posterior. Sobre la cara externa del osteodermo hay pequeños forámenes (de 2 a 5) sobre el borde anterior de la figura central que, en la zona central del escudo pélvico, están más desarrollados conformando un surco en ?U? abierto hacia atrás, que podría representar un desarrollo glandular local mayor. Este material, además de permitirnos evaluar las características de la coraza, provee nueva información para evaluar la diversidad y conocer mejor relaciones filogenéticas de armadillos paleógenos.
La reformulación del escenario político en clave peronista (1943-1955)
Lichtmajer, Leandro Ary
Con el derrocamiento de Castillo, el 4 de junio de 1943, culminó abruptamente el ciclo político abierto trece años antes. En el tramo final de su mandato, el vicepresidente en ejercicio navegaba las turbulentas aguas de un escenario dominado por el conflicto bélico internacional y por las impugnaciones que, desde diversos ángulos del arco político, se esgrimían a un gobierno dotado de bases endebles de legitimidad. En ese sentido, el fracaso de la tentativa de Ortiz por desandar las prácticas fraudulentas fue seguido por una etapa de afianzamiento conservador en desmedro del antipersonalismo. Como vimos, este proceso impactó de lleno en la dinámica política tucumana, al favorecer el desplazamiento del radicalismo concurrencista en manos de una intervención federal.
Migrantes senegaleses en Argentina: Contexto sociopolítico-laboral y vulneración de derechos
Goldberg, Alejandro; Sow, Papa
A través del análisis de una serie de entrevistas efectuadas a M. Mas-sar Ba, nos proponemos en este capítulo explorar las tramas de violencia institucional y para-institucional (Marmer y Sow, 2015) que, cada vez en mayor cantidad e intensidad, se ejecutan en el actual contexto sociopolítico nacional contra diferentes grupos que conforman los sectores subalternos de la sociedad argentina. Para abordar la problemática apuntada, nos cen-tramos particularmente en los migrantes senegaleses. En primer término, indagaremos en la genealogía de algunas de las concepciones hegemónicas sobre la otredad, la integración diferencial de los inmigrantes y la gestión socioterritorial de la diversidad en Argentina por parte de las élites gober-nantes, focalizando en la ciudad de Buenos Aires. En segundo lugar, repa-samos de forma breve el proceso migratorio senegalés en Argentina, desde sus antecedentes en el siglo XIX hasta las características del flujo migratorio actual, que comienza a manifestarse, principalmente, en la primera década de este milenio y continúa hasta la actualidad. Seguidamente, presentamos un análisis de los resultados de nuestras investigaciones priorizando dos aspectos interrelacionados: el ámbito laboral mayoritario de los migrantes senegaleses, esto es, la venta ambulante y el asociacionismo transnacional senegalés. Cerramos el capítulo con unas consideraciones finales.
"Brasil, decime qué se siente": Fútbol, música, narcisismo y estado, o el fracaso de Mascherano
Alabarces, Pablo Alejandro
A comienzos de los años 60, un grupo de jóvenes norteamericanos, más precisamente californianos, que habían nacido todos en 1945 y se llamaban John Fogerty, Doug Clifford y Stu Cook, formaron una banda de rock, como tantas otras que se formaban en esa época (o mejor aún: desde esa época hasta la actualidad) en California, en la costa oeste norteamericana. Eran de una pequeña ciudad llamada El Cerrito, al norte de San Francisco. Primero se llamaron The Blue Velvets, un nombre con algo de ridículo y algo de sonoro; era la época en que, por ejemplo, el cantante argentino Roberto Sánchez se hacía llamar Sandro y tenía una banda que se llamaba Los Caniches de Oklahoma. Era muy usual en esos años ponerle ese tipo de nombres a los grupos musicales, en la senda que habían abierto Bill Halley & The Comets a comienzos de los años 50 y luego profundizarían The Beatles, The Rolling Stones o The Doors, para mencionar sólo algunos; o en el caso argentino, Industria Nacional o Pintura Fresca (nombres ya depurados de la desenfrenada influencia anglófona).
Evaluación de la aptitud biológica de una población de nabo silvestre (Brassica rapa) con el transgen de resistencia a glifosato
Pandolfo, Claudio Ezequiel; Presotto, Alejandro Daniel; Vercellino, Román Boris; Ureta, Soledad; Cantamutto, Miguel; Poverene, Mónica
Brassica rapa (nabo) es una brasicácea anual, cuyas poblaciones silvestres son importantes invasoras de cultivos en todo el mundo, incluyendo la Argentina. Está emparentada con la colza canola (B. napus), cultivo de gran importancia a nivel mundial, que posee variedades transgénicas prohibidas en Argentina. Durante 2012, en el sudeste de la provincia de Buenos Aires, fueron halladas poblaciones de B. rapa resistentes a glifosato y se comprobó que la resistencia era de origen transgénico. El objetivo fue determinar si la presencia del transgen en estos biotipos implicaba un costo biológico. Se utilizó una población segregante para el carácter de resistencia y se seleccionaron mediante un test inmunológico 15 plantas con y sin la presencia de la proteína CP4 EPSPS, de origen transgénico. Las plantas se criaron a campo en condiciones de aislamiento y durante el ciclo se midieron caracteres de crecimiento y reproductivos. No se hallaron diferencias entre los dos grupos de plantas para los caracteres de altura, número de ramas, silicuas por inflorescencia y por planta. En el rendimiento total por planta se observó una tendencia a favor de los individuos sin el transgen, pero esta diferencia no fue significativa. Al contrario, las plantas transgénicas tuvieron más semillas por silicua, pero esto no se tradujo en diferencias en el número total de semillas por planta. Esto demostró que la presencia del transgen no disminuiría la aptitud biológica de esta población de B. rapa y su dispersión en ambientes ruderales sin presión de selección por glifosato no se vería limitada.
Caracterización de la actividad adrenocortical de Tamandua tetradactyla (Xenarthra: Pilosa) mediante la evaluación de la sensibilidad y la robustez
Eguizabal, Gabina Victoria; Busso, Juan Manuel
La respuesta adrenocortical al estrés resulta en un incremento de los glucocorticoides (GC) circulantes. Las evidencias en vertebrados indican que la magnitud del cambio a los desafíos ambientales (disponibilidad de alimento, ciclos de luz/oscuridad, etc.) varía según las características individuales (ej. historia de vida). Por lo tanto, los estudios de estrés fisiológico pueden beneficiarse evaluando a priori la sensibilidad y la robustez de la actividad adrenocortical. En el presente estudio, se evaluaron estas características en 3 machos y 3 hembras de Tamandua tetradactyla alojados individualmente en el Zoológico Córdoba. Para ello, se administró hormona adrenocorticotropina (ACTH i.m.; 0,5UI/kg) y dexametasona (Dexa i.m.; 0,1mg/kg), y se estudiaron las concentraciones de metabolitos de glucocorticoides fecales (MGF). Los porcentajes de cambio en las concentraciones de MGF se calcularon considerando el valor previo y el pico posterior al tratamiento para ACTH, y la inversa para Dexa. Por ejemplo, ACTH= 11,2*100/4,1 μg/g y Dexa= 100-(0,7*100/5,2) ug/g. Se observaron diferencias individuales en la respuesta a ACTH, siendo el incremento promedio de 303,4 ± 66,4% (CV 49%). Por su parte, el decremento por Dexa fue más homogéneo entre los ejemplares: 84,4 ± 1,63% (CV 4%). Considerando que la respuesta adrenocortical a ACTH reflejaría la capacidad máxima de secreción de GC, los resultados obtenidos permitirían clasificar las mediciones futuras dentro del rango funcional (respuesta adaptativa) o fuera del mismo (respuesta deletérea) de los ejemplares. El tratamiento con dexametasona confirmó que los animales exhibieron modulación de la actividad adrenocortical, lo que demuestra que no estarían en estado de estrés crónico. La aplicación de esta prueba farmacológica combinada en condiciones controladas, evaluada mediante técnicas no invasivas, podría ser útil no solo para clasificar a los individuos según su capacidad de reacción a los estímulos sino para sustentar pautas de manejo en el área de la fisiología de la conservación.
Brucella abortus-stimulated platelets actívate brain microvascular endothelial cells
Rodríguez, Ana María; Trotta, Aldana; Miraglia, Maria Cruz; Delpino, María Victoria; Barrionuevo, Paula; Giambartolomei, Guillermo Hernan
Central nervous system invasion by bacteria of the genus Brucella results in an inflammatory disorder called neurobrucellosis. Bloodbrain barrier activation is a common feature of human neurobrucellosis, but the underlying mechanisms are largely unknown. The aim of this work was to investigate the influence of B. abortus (B.a.)-activated platelets (PTL) on human brain microvascular endothelial cells (HBMEC). For this, supernatants (SN) from B.a.-stimulated human PTL were used to stimulate HBMEC. Expression of ICAM-1 (CD54) and secretion of IL-6, IL-8 and MCP-1 were evaluated to determine HBMEC´ activation. SN from B.a.-stimulated PLT induced a significant secretion of IL-6, IL-8, MCP-1 and the up-regulation of CD54 expression in a dose-dependent manner compared with SN from unstimulated PLT (p<0.001).To avoid the possible implication of B.a. outer membrane vesicles (OMV) we ultra-centrifuged the SN (to eliminate OMV). HBMEC were stimulated with ultra-centrifuge SN and we observed no differences on HBMEC’ activation compared with non-centrifuge SN (p>0.05), demonstrating that a soluble factor released from PLT was implicated on HBMEC’ activation. SN from heat-killed B.a.-stimulated PTL also activated HBMEC indicating that B.a.’ viability was not necessary in activating PLT. Soluble CD40L was not implicated on HBMEC’ activation, as an anti-CD40L antibody could not block cytokine secretion or ICAM-1 up-regulation. Treatment of SN with trypsin eliminate the effect (p<0.0005), demonstrating that the PLT effector is a protein. These results demonstrate that B.a.-stimulated PTL can activate brain endothelial cells, and this could be implicated on the entry to B.a. to the central nervous system
Novedoso ingrediente funcional: Liposoma con ácido linoleico conjugado
Vélez, María Ayelén; Perotti, Maria Cristina; Hynes, Erica Rut; Gennaro, Ana Maria
Publicación del proyecto en catálogo.Novedoso ingrediente funcional: liposomas con ácido linoleico conjugado. Novedoso ingrediente alimentario con ácidos grasos bioactivos (ácido linoleico conjugado CLA) en liposomas. Sus propiedades funcionales son la reducción del colesterol, aumento de las defensas y efecto antioxidante.
A new langmuir-schaefer-based method developed for catalytic studies of acetylcholinesterase in planar films of erythrocyte membranes
Felsztyna, Iván; Perillo, Maria Angelica; Clop, Eduardo Matias
Previously we reported that the catalytic activity of bovine erythrocyte acetylcholinesterase (BEA) located in Langmuir-Blodgett films (LB) of bovine erythrocyte membranes (BEM), LBBEA, depended on the curvature and packing of the molecular environment. Moreover, the specific activity of LBBEA was much lower than that of BEA in suspensions of BEM vesicles (SBEA). So, the present work was aimed at maximizing the specific activity of BEA recovered from the transfer of a Langmuir film (LF) from the air-aqueous interface to alkylated solid surfaces and improving the precision of the enzymatic assays. Three main changes were introduced to the previously assayed method. a) Phosphate saline buffer (PBS), pH 7.4 was used instead of H2O as the subphase over which was spread the BEM to form the LF, assuming that this composition, closer to physiological conditions, would be more effective than water in preserving the BEA protein structure/activity and the LF organization. b) BEA in LF films (LFBEA) was transferred from air-PBS interface to hydrophobic flat surfaces by the LangmuirSchaefer technique (LS) to obtain LSBEA samples. c) A new device was designed to allow performing the whole enzymatic activity assay using a unique LS film as well as the reading of the absorbance values in the same container. The LF of BEM at the air-PBS interface, compared with LF formed over H2O, showed surface pressure vs area (π-A) isotherms more expanded at low π, more compressible, with a bi-dimensional transition at lower π and lower minimal A. The surface potential reached 250 mV at the collapse point in both conditions (H2O and PBS). The specific activity resulted SBEA>>LSBEA>LBBEA. The use of PBS in the subphase and the transfer of LF at π=35mN/m instead of 10 mN/m improved the recovery of specific activity in LSBEA and LBBEA. The homogeneity of BEA distribution in LSBEA samples highly improved the precision of the kinetic parameters determined in different molecular packing conditions.
Estudiar limite y derivada en la escuela secundaria: Una propuesta desde la teoría antropológica de lo didáctico
Parra, Verónica Ester; Otero, Maria Rita
En este trabajo proponemos un recorrido de estudio e investigación (REI) concebido para el último año del nivel secundario argentino. de Los REI requieren abordar la enseñanza de la Matemática desde un paradigma emergente y muy diferente del tradicional, según los postulados centrales de la teoría antropológica de lo didáctico (TAD) (Chevallard, 1999, 2004, 2013a). Uno de los principios fundamentales puede enunciarse en los siguientes términos: enseñar matemática a partir de la formulación de preguntas con la consecuente búsqueda de respuestas por parte de la comunidad de estudio (estudiantes y profesor) de manera colectiva...
Potencialidades del aceite esencial de Curcuma longa L. para su aplicación en recubrimientos antifúngicos
Gámez Espinosa, Erasmo Junior; Barberia Roque, Leyanet; Deya, Marta Cecilia; Lima, Nelson; Bellotti, Natalia
Los materiales estructurales utilizados en la construcción pueden ser biodeteriorados por bacterias, hongos y algas. Propiedades de estos materiales, como la alta porosidad, los hacen susceptibles a la colonización microbiológica en especial por parte de hongos filamentosos que se encuentran entre los más deteriorantes. Para evitar dicha colonización se utilizan recubrimientos antimicrobianos formulados con uno o más compuestos bioactivos (biocidas) muchas veces cuestionados por su toxicidad. Por tanto, la aplicación de aceites esenciales en la formulación de recubrimientos con capacidad antifúngica para evitar el biodeterioro de los materiales, se presenta como una solución viable que muestra ventajas desde el punto de vista económico y medioambiental. Se pretende con este trabajo evaluar las potencialidades del aceite esencial (AE) de Curcuma longa L. para su aplicación en recubrimientos antifúngicos, mediante la posible acción biocida del aceite sobre Aspergillus flavus MUM 16.01. Se seleccionó Aspergillus flavus por ser una de las especies con mayor frecuencia de aparición en estudios relacionados con aeromicología[4] y específicamente la cepa MUM 16.01 por encontrarse en una micoteca certificada por la Norma ISO 9001. Se evaluó el efecto del AE de C. longa en tres concentraciones (0,001; 0,1; 1,0 % v/v) sobre el crecimiento superficial del micelio de la cepa de A. flavus inoculada (106 conidios/mL) por punción sobre placas de Petri con Agar Czapek. Se incubaron a 25oC durante 7 días y se midió el diámetro de la colonia. Además, se evaluó la inhibición en la germinación de conidios de la especie referida frente a distintas concentraciones (0,001; 0,1; 1,0 % v/v) de: AE de C. longa L., propóleo cubano, un detergente antiséptico (Deconex) y un surfactante (Tween 20) por dilución en etanol al 95% en placas de 96 pocillos que fueron inoculados con 10 μL de la suspensión de conidios. La germinación de los conidios se evaluó a las 24 h, contando 200 conidios en cada pocillo con ayuda de un microscopio óptico. La inhibición de la germinación se expresó como porcentaje (%) de las esporas o conidios no germinados respecto al total. Hubo diferencia estadísticamente significativa (p ≤ 0,05) del crecimiento superficial del micelio de A. flavus según las diferentes concentraciones del AE de C. longa, con una relación inversamente proporcional. Este producto natural con 1% v/v redujo más de tres veces el diámetro de dicha colonia (9 a 2,6 cm) (Figura 1), resultado que concuerda con el de AE de clavo de olor sobre una cepa de A. flavus.El aceite esencial de C. longa al 1% inhibió entre 41 y 55% de las esporas (Figura 2), valores similares a los del detergente comercial Deconex. Con concentraciones diez y cien veces más bajos (0,01 y 0,1%) no superó el 30% de la inhibición pero superó significativamente al mencionado producto sintético. Por lo tanto el AE mostró un efecto inhibitorio de la germinación, del crecimiento y la conidiogénesis y se lo puede considerar como un producto natural de alta actividad antifúngica. Debido a esto último, puede ser usado en la formulación de recubrimientos antifúngicos.
Determinación de ocratoxina a en te y café mediante dllme-sfo asociada a UHPLC-MS/MS
Cina, Mariel; Mariño Repizo, Leonardo; Martinez, Luis Dante; Cerutti, Estela Soledad
El consumo de infusiones como café y té representan una larga tradición en diferentes partes del mundo. Estas bebidas son reconocidas por sus componentes estimulantes, cafeína, catequinas, así como también por una serie de sustancias antioxidantes beneficiosas (compuestos fenólicos, flavonoides), componentes bioactivos; entre otros. Sin embargo, estas infusiones pueden contener compuestos dañinos a la salud tales como micotoxinas, entre ellas Ocratoxina A (OTA) [1].Esta proviene de los hongos Penicillium y Aspergillus, que pueden aparecer en distintos cereales y alimentos derivados como es caso del té y el café. Así, Según la Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer (IARC), ha catalogado a OTA en el grupo 2B, debido a su efecto nefrotóxico, hepatotóxico, inmunotóxico, neurotóxico, teratogénico y cancerígeno, por los que representa un alto riesgo para la salud [2]. Entes reguladores de la Comunidad Europea han establecido un valor de 5 μg kg-1 y 10 μg kg-1 como límite máximo permitido (MAL) de OTA en café soluble y café tostado, en grano o molido; respectivamente, [3]. Sin embargo, no existe aún un MAL sobre el contenido de OTA en té.En este contexto, se desarrolló una metodología empleando UHPLC-MS/MS para la determinación de OTA en té y café. Las diferentes matrices fueron sometidas a una etapa de clean-up, la cual consistió en una microextracción líquido-líquido dispersiva basada en la solidificación de la gota orgánica flotante (DLLME-SFO), cuyas variables fueron optimizadas, incluyéndose el estudio de efecto de matriz, el cual fue en promedio del 70% de supresión de señal para ambas muestras. En cuanto a las cifras de mérito, esta metodología presentó recuperaciones entre 81% y 90%, con una precisión (reproducibilidad intralaboratorio) del 18% (RSD%); además los límites de detección y cuantificación fueron 0,1 μg kg-1 y 0,9 μg kg-1; respectivamente. Esto indica que la metodología desarrollada es adecuada para el análisis de OTA en muestras de té, y a su vez satisfactoria para la detección de esta micotoxina en muestras de café de acuerdo a las normativas internacionales respecto al MAL establecido para café.
Separación quiral de propranolol por EKC empleando nanodiamantes- albúmina como fase pseudoestacionaria
Lanaro, Verónica Mariél; Stege, Patricia Wanda; Sombra, Lorena Luján; Martinez, Luis Dante; Almeida, César Américo
En la actualidad, los contaminantes emergentes generan una gran preocupación, entre ellos encontramos los fármacos β-bloqueantes, comúnmente utilizados para el tratamiento de enfermedades del corazón. Conocer la estereoquímica de estos contaminantes es significativo debido a la diferente toxicidad presentada por sus estereoisómeros. Propranolol se vende y administra como una mezcla racémica y aunque el enantiómero (S) es el farmacológicamente activo, el enantiómero (R) es el que tiene efectos tóxicos. Estos presentan un metabolismo incompleto y son excretados a través de la orina, encontrándose en efluentes de aguas residuales y aguas superficiales. Además, por su alto potencial de bioacumulación, puede considerarse perjudicial para los organismos acuáticos. Sin embargo, la determinación de propranolol en muestras ambientales representa una difícil tarea analítica considerando su baja concentración así como la naturaleza compleja de la matriz. La cromatografía electrocinética (EKC) introduce una fase pseudoestacionaria (PSP) cuya ventaja es una mayor interacción para los analitos. Por otra parte, las nanopartículas se han evaluado como selectores quirales, al igual que las proteínas, para la separación enantiomérica; lo que permite una mejora en la separación de los analitos.En este trabajo, se determinó la concentración de R- y S-propranolol en muestras de efluentes mediante EKC, luego de la preconcentración empleando columnas de intercambio iónico. Para la limpieza y preconcentración de las muestra, se empleó 500 mL acondicionadas a pH 11; luego se filtraron a través de columnas de vidrio conteniendo Amberlite® IR-120 y Amberlite® IRA-410, (malla 20-25). A continuación, se eluyeron los enantiomeros a pH 7,4 con tampón fosfato 0,1 M; recepcionando el eluato sobre una columna catiónica Dowex® 50WX8, malla 200-400. Finalmente, R- y S- propranolol fueron eluidos con 10 mL de una solución buffer borato/acetonitrilo (90/10) de pH 11. La PSP consistió en nanodiamantes-albúmina (NDs-albúmina) incorporados al buffer tetraborato de sodio 40 mM (pH = 9,4); empleándose una corriente de 16 kV y detector UV a 290 nm, con un tiempo de respuesta de 0,1 s. En estas condiciones se logró un rango lineal de 0,95 a 50 µg L-1 de propranolol, con un límite de detección de 0,09 µg L-1 y una resolución de 2,73. Se analizaron tres muestras cuyos valores fueron de 1,02; 0,59 y 0,30 µg L-1 de R-propranolol; y 0,99; 0,54 y 0,20 µg L-1 de S-propranolol. Además, se realizaron ensayos de recuperación con el fin de controlar la exactitud del método y detectar errores sistemáticos durante el análisis. Los valores de recuperación fueron entre el 96,4 - 99,3 %. El presente trabajo fue financiado a través de los proyectos PROICO 2-0202, PICT-2014-3416. Los autores agradecen a la Universidad Nacional de San Luis; al Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; y a la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica.
Determinación de etinilestradiol en agua de ríos de la provincia de San Luis, utilizando un immunosensor basado de papel
Scala Benuzzi, María Luz; Bertolino, Franco Adrián; Soler-Illia, Galo J. A. A.; Schneider, Rudolf J.; Raba, Julio; Messina, Germán A.
Etinilestradiol (EE2) es un estrógeno sintético derivado del estradiol. Su uso más frecuente es en combinación con gestágenos para la preparación de anticonceptivos orales. EE2 es considerado un interruptor endócrino y se lo incluye dentro de los llamados contaminante emergentes del agua [1] como resultado de la excreción humana y animal, ocasionando problemas ambientales y efectos adversos para la salud humana y de diferentes organismos que habitan dicho ambiente [2]. Con el fin de detectar y cuantificar EE2 en muestras de agua de río, se desarrolló un novedoso dispositivo analítico basado en papel (PAD), acoplado a detección LIF (FPAD), utilizado como plataforma de reacción para un enzimo inmunoensayo de tipo competitivo para EE2. Para el desarrollo del DAP, microzonas de papel de filtro, impresas por el método de wax printing, fueron modificadas con nanopartículas de silica (SNs) y posteriormente, se inmovilizaron sobre los mismos anticuerpos específicos anti-EE2.La determinación de EE2 en agua se realizó adicionando a las muestras y a los estándares, una concentración fija de EE2 conjugado con la enzima peroxidasa del rábano picante (HRP). Posteriormente se adicionaron los DAP y fueron incubaron durante 30 min. Finalmente, se llevó a cabo la detección mediante la reacción de 10-acetil-3,7-dihidroxifenoxacina (ADHP) cuya oxidación es catalizada por la HRP en presencia de H2O2, obteniendo el producto fluorescente resorufina. El cual fue detectado mediante LIF utilizando una longitud de onda de excitación de 535 nm y de emisión de 580 nm. La concentración de EE2 en las muestras fue inversamente proporcional a la fluorescencia relativa obtenida de los productos de reacción enzimática. El método propuesto mostro coeficientes de variación intra e inter-ensayo menores a 4,5% y 6.5% respectivamente y un límite de detección (LOD) de 10 ng L-1. Los resultados obtenidos muestran la utilidad potencial de nuestro FPAD para la cuantificación selectiva y sensible de EE2 en muestras de agua de rio de la provincia de San Luis. Además, por tratarse de novedosos PADs presentan la ventaja de ser descartables, de fácil aplicación y de bajo costo.
Determinación de selenoaminoácidos por cromatografía líquida, acoplada a espectrometría de masa con plasma inductivamente acoplado (hplc-icp-ms) en distintas variedades de olivos (olea europeae sp.)
Hasuoka, Paul Emir; Pacheco, Pablo Hugo; Martínez, Dante
El selenio es un elemento esencial para los seres humanos, integrante de selenoproteínas, enzimas antioxidantes que previenen el daño celular producido por radicales libres. El aceite de oliva extra virgen se produce a partir de la planta de olivo (Olea europea L.), cuya característica más importante es la conservación inalterable de todos los componentes y propiedades de las aceitunas, sin aditivos ni conservantes, destacando su valor nutritivo y sus propiedades antioxidantes. Recientes estudios mediante técnicas analíticas han demostrado la presencia de seleno-aminoácidos en los aceites de oliva, como seleno-metil-selenocisteína (SeMeSeMet) y seleno-cisteína (SeCys). La determinación de los selenoaminoácidos libres e integrados a proteínas en aceites es importante desde un punto de vista nutricional considerando su biodisponibilidad y el papel de Se en la reducción del estrés oxidativo. Este trabajo tiene por objetivo la determinación de la concentración de selenoaminoácidos en hojas y aceitunas de 8 especies de olivo, cultivados bajo las mismas condiciones, y en el mismo suelo, a fin de establecer las especies de plantas con mayor capacidad de producción de selenoaminoácidos, y obtener así aceites enriquecidos en estos compuestos. La extracción se realizó pulverizando la muestra (frutos y hojas) con nitrógeno líquido con el objetivo de liberar selenoproteínas. A continuación se realiza una extracción con buffer Tris-SDS-HCl y se centrifuga. En el sobrenadante, donde se encuentran las proteínas extraídas, se hidrolizan en medio ácido y microondas, con el propósito de liberar los selenoaminoácidos de las mismas. Finalmente los selenoaminoácidos se determinaron por cromatografía en fase reversa acoplada a espectrometría de masa con plasma inductivamente acoplado (RPC-ICP MS). En las muestras se determinó principalmente SeCys, encontrando concentraciones más elevadas en aceitunas (fruto), en un rango entre 523.61 – 21.43 μg/kg; siendo las variaciones significativas entre las distintas especies. En hojas las concentracioens determinadas de SeCys fueron de 36.86 – 22.48 μg/kg, siendo las diferencias no significativas. Otros selenoaminoácidos como SeMeSeMet y SeMet también fueron determinados pero no en todas las muestras. La concentración de selenocisteína más elevada se encontró en aceitunas de la especie de olivo Galego.
Determinación de plomo en productos alternativos de tabaco mediante fluorescencia molecular
Pereyra, Fernando; Santarossa, Debora Gimena; Talio, María Carolina; Fernandez, Liliana Patricia
Introducción: El consumo de tabaco constituye la principal causa de morbi-mortalidad en el mundo, ocasionando más de 6 millones de defunciones por año. Actualmente, a raíz de las normativas comprendidas en el Convenio Marco para el Control del Tabaco de la OMS y de las leyes que surgen de dicho convenio se han introducido al mercado “alternativas saludables para consumo de tabaco”: narguile o pipa de agua, rapé y cigarrillos electrónicos [1]. El análisis de metales pesados en productos alternativos de consumo de tabaco resulta de gran interés en los campos de química, biología, toxicología y ciencias de la salud. El plomo es un tóxico metálico cuyas principales fuentes de ingreso al organismo son el aire inhalado, los alimentos, el agua de bebida y el cigarrillo. La intoxicación crónica con este metal da lugar a una patología denominada saturnismo que se caracteriza por anemia intensa, alteraciones digestivas, cardiovasculares, renales y nerviosas [2]. En el presente trabajo se propone una metodología alternativa a los métodos tradicionales para la determinación Pb(II) mediante fluorescencia molecular en productos alternativos de tabaco. Resultados: La mencionada metodología se fundamenta en la formación de un complejo ternario del metal con o-fenantrolina y 8-hidroquinoleína a pH 6 regulado con buffer fosfato. La determinación de Pb(II) se llevó a cabo mediante fluorescencia molecular a em = 545 nm (exc = 515 nm). Entre los parámetros experimentales que influyen sobre emisión fluorescente, se optimizaron las concentraciones de los reactivos complejantes, concentración y naturaleza del buffer, pH de formación del complejo, orden de adición de los reactivos. Respecto a la etapa de lixiviación del metal presente en las muestras, se optimizaron tiempo de contacto, pH de la solución lixiviante, temperatura de lixiviación, presencia y ausencia de agitación. En las condiciones óptimas de trabajo, se logró un LOD de 0,42 µg L−1 y un LOQ 1,27 µg L−1 , con un intervalo de linealidad de 1,27 a 51,80 μg L−1 . Conclusión: La metodología mostró ser una alternativa adecuada para la determinación y monitoreo de Pb en los productos alternativos de tabaco analizados; se prevé su automatización en vías a mejorar la velocidad de muestreo y poder contribuir a áreas como la química verde, monitoreo y control de tabaco.