Insight into the mechanism of acetonitrile hydrogenation in liquid phase on Pt/Al 2 O 3 by ATR-FTIR Aguirre, Alejo; Collins, Sebastián Enrique The mechanism of the acetonitrile hydrogenation to amines over a platinum/alumina catalyst was investigated by in situ infrared spectroscopy. The reaction was studied under realistic conditions -liquid phase using toluene as solvent- using a flow-through cell-microreactor in Attenuated Total Reflection (ATR) mode. Acetonitrile linearly chemisorbed on platinum sites is stepwise hydrogenated to form an imine surface intermediate (CH 3 CH = NH), which in turn is hydrogenated to ethylamine. Using deuterium, the sequential formation of C?D and N?D bonds was observed. Then, imine intermediate can condense producing diethylamine and triethylamine, giving ammonia as a by-product. The temporal evolution of the IR signals was modeled using a proposed microkinetic mechanism and intrinsic kinetic constants were obtained under chemical control.

La Primera Guerra Mundial y la conducta económica del estado en el pensamiento militar en Argentina; First World War and State’s economic behavour in Argentina’s military thought Avellaneda, Aldo Nicolás Los estudios sobre el pensamiento económico en América Latina no se han detenido en los cuadros militares como actores sociales relevantes a lo largo de casi todo el siglo XX. En este artículo trato de rastrear el surgimiento del interés y la preocupación por el comportamiento económico del Estado en las reflexiones militares. Identifico la Primera Guerra Mundial como una coyuntura crítica que introduce la pregunta por la economía y que viene de la mano de la convicción en el pensamiento militar de que en adelante las guerras serán industriales o no serán. Por medio de un repaso de diversas publicaciones militares —revistas, libros y memorias ministeriales— intento seguir el recorrido de las reflexiones, que parten del interés por la propia potencia militar, pero que rápidamente pasan a considerar la posibilidad y los beneficios de un Estado que apoye una planificación industrial.; Economic Thought’ Studies in Latin America have not paid attention to military cadres as relevant social actors throughout most of the 20th century. In this article I try to trace the emergence of interest and concern for the economic behavior of the State in military reflections. I identify the First World War as a critical episode which introduces the question on the state economy. It comes from the hand of a conviction in military thought that from now on wars will be industrial or they won’t. Through a review of various military publications —journals, books and ministerial reports— I try to follow the course of their reflections, which start from the interest for the military power itself, but quickly come to consider the very possibility and the benefits of a State that support industrial planning.

The role of freshwater copepods in the environmental risk assessment of caffeine and propranolol mixtures in the surface water bodies of Spain Di Lorenzo, Tiziana; Castaño Sánchez, Andrea; Di Marzio, Walter Dario; García Doncel, Patricia; Nozal Martínez, Leonor; Galassi, Diana Maria Paola; Iepure, Sanda In this study we aimed at assessing: (i) the environmental risk posed by mixtures of caffeine and propranolol to the freshwater ecosystems of Spain; (ii) the sensitivity of freshwater copepod species to the two compounds; (iii) if the toxicity of caffeine and propranolol to freshwater copepods contributes to the environmental risk posed by the two compounds in the freshwater bodies of Spain. The environmental risk was computed as the ratio of MECs (i.e. the measured environmental concentrations) to PNECs (i.e. the respective predicted no-effect concentrations). The effects of caffeine and propranolol on the freshwater cyclopoid Diacyclops crassicaudis crassicaudis were tested both individually and in binary mixtures. Propranolol posed an environmental risk in some but not in all the surface water ecosystems of Spain investigated in this study, while caffeine posed an environmental risk to all the investigated freshwater bodies, both as single compound and in the mixture with propranolol. Propranolol was the most toxic compound to D. crassicaudis crassicaudis, while caffeine was non-toxic to this species. The CA model predicted the toxicity of the propranolol and caffeine mixture for this species. D. crassicaudis crassicaudis was much less sensitive than several other aquatic species to both compounds. The sensitivity of D. crassicaudis crassicaudis does not increase the environmental risk posed by the two compounds in the freshwater bodies of Spain, however, further testing is recommended since the effect of toxicants on freshwater copepods can be more pronounced under multiple stressors and temperature increasing due to climate change.

Glyco-iELISA: a highly sensitive and unambiguous serological method to diagnose STEC-HUS caused by serotype O157 Wijnsma, Kioa; Veissi, Susan T.; van Bommel, Sheila A. M.; Heuver, Rik; Volokhina, Elena B.; Comerci, Diego José; Ugalde, Juan Esteban; van de Kar, Nicole C. A. J.; van den Heuvel, Lambertus P. W. J. Background: Providing proof of presence of Shiga toxin–producing E. coli (STEC) infection forms the basis for differentiating STEC-hemolytic uremic syndrome (HUS) and atypical HUS. As the gold standard to diagnose STEC-HUS has limitations, using ELISA to detect serum antibodies against STEC lipopolysaccharides (LPS) has proven additional value. Yet, conventional LPS-ELISA has drawbacks, most importantly presence of cross-reactivity due to the conserved lipid A part of LPS. The newly described glyco-iELISA tackles this issue by using modified LPS that eliminates the lipid A part. Here, the incremental value of glyco-iELISA compared to LPS-ELISA is assessed. Methods: A retrospective study was performed including all pediatric patients (n = 51) presenting with a clinical pattern of STEC-HUS between 1990 and 2014 in our hospital. Subsequently, the diagnostic value of glyco-iELISA was evaluated in a retrospective nationwide study (n = 264) of patients with thrombotic microangiopathy (TMA). LPS- and glyco-iELISA were performed to detect IgM against STEC serotype O157. Both serological tests were compared with each other and with fecal diagnostics. Results: Glyco-iELISA is highly sensitive and has no cross-reactivity. In the single-center cohort, fecal diagnostics, LPS-ELISA, and glyco-iELISA identified STEC O157 infection in 43%, 65%, and 78% of patients, respectively. Combining glyco-iELISA with fecal diagnostics, STEC infection due to O157 was detected in 89% of patients. In the nationwide cohort, 19 additional patients (8%) were diagnosed with STEC-HUS by glyco-iELISA. Conclusion: This study shows that using glyco-iELISA to detect IgM against STEC serotype O157 has clear benefit compared to conventional LPS-ELISA, contributing to optimal diagnostics in STEC-HUS.

Administration of Lactobacillus plantarum Lp62 to dam rats at the end of delivery and during lactation affects TGF-β1 level and nutritional milk composition, and body weight of pups Messias, Gladistone Correia; Rocha, Ana Marta Novais; Santos, Beatriz Manuela Silva; Botelho, Ana Marques; Silva, Dhaísa Cristhina Alves; Porto, Erika Santos; dos Anjos, Marina Lima; Sousa, Rayra Almeida; Silva, Mara Viana; da Rocha, Thainara Barros; de Melo, Aracely Vieira; Carneiro, Manoela Rios Trindade; Aguiar, Nayonara Santana; Santos, Patrícia Prado; de Souza, Erika Pereira; Cruz, Mariluze Peixoto; Marques, Lucas Miranda; Rezende, Raquel Passos; Romano, Carla Cristina; Uetanabaro, Ana Paula; Vinderola, Celso Gabriel; Yatsuda, Regiane Purpose: Lactobacillus plantarum Lp62 is a lactic acid bacteria strain that has been isolated from cocoa beans and exhibited probiotic potential. The influence of oral administration of L. plantarum Lp62 on the growth of rat’s pups; on yield, cytokines and milk composition was studied. Methods: Lactobacillus plantarum Lp62 is a lactic acid bacteria strain that has been isolated from cocoa beans. It was administered daily by gavage to Wistar rats (n = 8), from the 7th day before delivery and for 20 days during lactation, in a concentration of 1.44 × 10 9 CFU/rat. The dam and pups were weighed and milk was collected at 12th and 19th day for determination of protein, triglycerides, cholesterol and lactose by colorimetric assays. TGF-β1 milk levels were analyzed by ELISA. The mammary glands of rats were removed for histological analysis. To detect statistical differences between the groups, tests of mean differences at a significance level of 5% was performed. Results: Supplementation with L. plantarum L62 resulted in significant higher weight of pups (p < 0.05), with similar weight on dams (p > 0.05). The milk yield was not altered by L. plantarum treatment, but the levels of protein, triglycerides and cholesterol were increased (p < 0.05), with no difference in lactose concentration (p > 0.05). Levels of TGF-β1 were higher in the milk of L. plantarum treatment (p < 0.05). Conclusions: The treatment of dams at the end of pregnancy and lactation with L. plantarum Lp62 increased nutritional content of milk, probably contributing to the higher weight of the pups. The higher levels of TGF-β1 in the milk, could promote immune benefits to the pups. Further studies in this field are needed to prove the potential use of L. plantarum Lp62 as a probiotic.

A high-throughput screening for inhibitors of riboflavin synthase identifies novel antimicrobial compounds to treat brucellosis Serer, María Inés; Carrica, Mariela del Carmen; Trappe, Jörg; López Romero, Sandra; Bonomi, Hernán Ruy; Klinke, Sebastian; Cerutti, Maria Laura; Goldbaum, Fernando Alberto Brucella spp. are pathogenic intracellular Gram‐negative bacteria adapted to life within cells of several mammals, including humans. These bacteria are the causative agent of brucellosis, one of the zoonotic infections with the highest incidence in the world and for which a human vaccine is still unavailable. Current therapeutic treatments against brucellosis are based on the combination of two or more antibiotics for prolonged periods, which may lead to antibiotic resistance in the population. Riboflavin (vitamin B2) is biosynthesized by microorganisms and plants but mammals, including humans, must obtain it from dietary sources. Owing to the absence of the riboflavin biosynthetic enzymes in animals, this pathway is nowadays regarded as a rich resource of targets for the development of new antimicrobial agents. In this work, we describe a high‐throughput screening approach to identify inhibitors of the enzymatic activity of riboflavin synthase, the last enzyme in this pathway. We also provide evidence for their subsequent validation as potential drug candidates in an in vitro brucellosis infection model. From an initial set of 44 000 highly diverse low molecular weight compounds with drug‐like properties, we were able to identify ten molecules with 50% inhibitory concentrations in the low micromolar range. Further Brucella culture and intramacrophagic replication experiments showed that the most effective bactericidal compounds share a 2‐Phenylamidazo[2,1‐b][1,3]benzothiazole chemical scaffold. Altogether, these findings set up the basis for the subsequent lead optimization process and represent a promising advancement in the pursuit of novel and effective antimicrobial compounds against brucellosis.

Sex differences in cold hardiness and desiccation tolerance of invasive apple snails in South China Guo, Jing; Xu, Wubing; Martín, Pablo Rafael; Zhang, Chunxia; Zhang, Jiaen Sex differences in stress responses may be a key factor that determines population structure. Sex ratios of Pomacea canaliculata populations usually average 1:1 at birth, but are often female-biased for adults. Low temperatures and drought are the main abiotic stresses affecting reproductive dispersal and population development. Therefore, we investigated whether Pomacea sp. (mainly P. canaliculata but might include P. maculata) exhibited sex differences in cold hardiness and desiccation tolerance. Results show that more females survived than males during cold-drought stress and overwintering. Following cold-drought stress, 58% of females and 40% of males survived at 3°C drought conditions for 6 days. With the development of cold-drought hardiness, increased amounts of bound water, glycerol and lipids were found in Pomacea sp. along with decreased free water levels. These physiological parameters exhibited sex differences in the snails, except for lipids, and the changes all showed tendencies favoring the survival of females under cold-drought stress. These results suggest that female Pomacea sp. may be more viable than males under cold and dry conditions.

Resistencia a carbapenemes mediada por metalo-β-lactamasas en bacilos gram-negativos no fermentadores: plataformas genéticas responsables de su diseminación Brovedan, Marco Alcides La emergencia de cepas resistentes a los β-lactámicos en bacilos Gram-negativos (BGN) incluyendo enterobacterias y bacilos no fermentadores (BNF) como Pseudomonas spp. y Acinetobacter spp. causa un impacto significativo en infecciones hospitalarias provocadas por clones multirresistentes (MR). El principal mecanismo de resistencia en BGN es la inactivación de β-lactámicos mediante la acción de enzimas denominadas β-lactamasas (Bush, 2018). Entre las distintas clases de -lactamasas, las carbapenemasas revisten la máxima importancia clínica, dado que hidrolizan carbapenemes, -lactámicos de última generación, que suelen ser la última opción terapéutica para pacientes con infecciones por BGN MR (Queenan y Bush, 2007). Esta familia de enzimas está constituida por serino--lactamasas (SLs) así como por metalo--lactamasas (MLs) (Queenan y Bush, 2007). Estas últimas revisten una enorme relevancia clínica debido a su extendido espectro de acción, ya que son capaces de hidrolizar todos los -lactámicos (a excepción del aztreonam), a su asociación con otros genes de resistencia y a que aún no cuentan con inhibidores de uso clínico (Nordmann et al., 2012; Zhao y Hu, 2015). Al presente, al menos 11 familias de MβLs adquiridas han sido descriptas siendo las de tipo-IMP, -VIM y -NDM mayormente detectadas a nivel mundial en cepas clínicas de BGN (Zhao y Hu, 2015; Mojica et al., 2016; Wu et al., 2019). Estas enzimas constituyen un mecanismo de resistencia con elevada implicancia epidemiológica debido a la asociación de sus genes codificantes a diversos elementos genéticos incluyendo plásmidos, integrones, secuencias de inserción y transposones, generando un desalentador escenario clínico, al cual se han referido como de ?catástrofe clínica? (Cornaglia et al., 2011). En este contexto, en este Trabajo de Tesis se han caracterizado plataformas de diseminación de genes de resistencia emergentes, como blaVIM-2 y blaNDM-1, evaluando asimismo los eventos involucrados en el ensamble y transferencia de dichas plataformas. Para ello, se han seleccionado como modelos de estudio especies ambientales del grupo de BNF productoras de MβLs de impacto clínico, como Pseudomonas grupo putida productoras de VIM-2 y Acinetobacter bereziniae, de NDM-1, bajo la hipótesis de que estas especies actuarían como nexo entre nichos ambiental y clínico, constituyendo así reservorios de genes de resistencia.Trabajos previos del laboratorio abordaron la caracterización preliminar de las plataformas genéticas de movilización de blaVIM-2 en 12 aislamientos clínicos de P. putida, identificados por VITEK-2, los cuales son portadores de los integrones/transposones tipo-Tn402. En este trabajo se profundizó la caracterización y localización de dichas plataformas así como aquellas presentes en aislamientos no estudiados previamente, P. putida HB157 y P. aeruginosa HV868 por constituir este aislamiento clínico la primer cepa local de la especie productora de VIM-2. Para ello, inicialmente se abordó la caracterización taxonómica de los 13 aislamientos de P. putida basada en MLSA, empleando secuencias parciales de ARNr 16S, gyrB y rpoD, según esquemas propuestos para grupos o complejos de Pseudomonas spp. Este análisis identificó 7 especies de P. grupo putida, incluyendo las especies P. putida (aislamientos # BA9115 y BA7908) y P. monteilii (#HB157 y BA9713); especies nuevas propuestas por Mulet y cols., como P. grupo putida/II (#LA1008 y HE1012); P. grupo putida/IV (#LD209, HP613, HB313 y BA7816); P. grupo putida/I (#HP813); P. grupo putida/V (#BA9605); así como una nueva especie asignada aquí como P. grupo putida/VII (#LA111). Así, la caracterización molecular permitió distinguir una variabilidad de especies filogenéticamente relacionadas. Análisis de identidad clonal de aislamientos clínicos de la misma especie mediante OD-PCR, pusieron de manifiesto a su vez una totalidad de 11 clones diferentes, lo cual permitió identificar la diversidad genética de la colección de aislamientos bajo estudio. La caracterización molecular de las plataformas portadoras de blaVIM-2 reveló la presencia de integrones/transposones tipo-Tn402 en todos los aislamientos en estudio. Entre ellos, se detectaron dos elementos estrechamente relacionados entre sí, ambos con la maquinaria de transposición completa, que incluye módulo de transposición (tni) e IRs flanqueantes, los cuales fueron designados Tn6335 y Tn6336. El primero de ellos fue hallado en 7 especies diferentes de P. grupo putida incluyendo P. putida (#BA7908), P. monteilii (#BA9713), P. grupo putida/I (#HP813), P. grupo putida/II (#LA1008 y HE1012), P. grupo putida/IV (#LD209, HP613 y HB313), P. grupo putida/V (#BA9605) y P. grupo putida/VII (#LA111); así como en P. aeruginosa (#HV868); mientras que Tn6336 fue hallado en las especies P. putida (#BA9115) y P. grupo putida/IV (#BA7816). La estructura genética del Tn6335 incluye al integrón In41, el cual posee en su región variable blaVIM-2-aacA4, mientras que Tn6336 incluye al In899, cuya región variable contiene solo blaVIM-2. La tercer estructura caracterizada fue la plataforma de P. monteilii HB157, la cual mostró un transposón tipo-Tn402 incompleto portador del In528 siendo su estructura IRi-intI1-dhfrB-aacA4-blaVIM-2-tniC-IS6100. El conjunto de resultados reveló la prevalencia de integrones/transposones tipo-Tn402 relacionados entre sí en diferentes especies de P. grupo putida así como en la cepa de P. aeruginosa incluida en el estudio, lo cual sugiere la transferencia de estos elementos genéticos entre diferentes especies de Pseudomonas. Estos resultados motivaron así el análisis de los mecanismos involucrados en la diseminación de dichos transposones.El análisis taxonómico efectuado en este trabajo de las cepas bajo estudio permitió reconocer que la movilización de blaVIM-2 mediante ensayos de transferencia de ADN previamente realizados en el laboratorio, se halla esencialmente ligada a plásmidos conjugativos de amplio rango de hospedador, que son transferidos entre las diferentes especies de P. grupo putida. Ensayos de transferencia de ADN realizados en este trabajo para aislamientos previamente no caracterizados, P. monteilii HB157 y P. aeruginosa HV868, mostraron que en esta última especie, blaVIM-2 se encuentra localizado en un plásmido replicativo en P. aeruginosa aunque no en E. coli. Ensayos posteriores de restricción de los extractos plasmídicos, y secuenciación nucleotídica en casos seleccionados, revelaron que los plásmidos derivados de P. grupo putida/II HE1012 (pHE1012); P. grupo putida/IV HB313 (pHB313) y BA7816 (pBA7816); y P. grupo putida/V BA9605 (pBA9605) tienen una arquitectura similar respecto a plásmidos controles empleados derivados de P. grupo putida/IV, y de P. grupo putida/VII (pLD209 y pLA111, respectivamente), secuenciados previamente. Estos resultados pusieron de manifiesto la identidad de los mismos, denominados por ello plásmidos tipo-pLD209; resultados que indican la circulación de los mismos por diferentes cepas así como entre diferentes especies de P. grupo putida. Análisis de localización de las plataformas portadoras de blaVIM-2 según ensayos de digestión del ADN genómico con S1 o XbaI/PFGE y ensayos de hibridación permitieron determinar la portación cromosomal de blaVIM-2 para P. putida BA9115 y BA7908, P. monteilii HB157 y BA9713, P. grupo putida/I HP813, P. grupo putida/II LA1008 y P. grupo putida/IV HP613, como así también confirmar la portación de blaVIM-2 en plásmidos tipo-pLD209 en los restantes aislamientos de P. grupo putida. Para el caso de P. aeruginosa HV868, la banda de elevado tamaño molecular según S1/PFGE correspondería al plásmido conjugativo resultante de ensayos de transferencia de ADN. Por último, la evaluación de los sitios de inserción del Tn6335 en cromosoma de P. grupo putida/IV HP613 y P. grupo putida/II LA1008 revelaron que el mismo se encuentra interrumpiendo el sitio res de transposones tipo-Tn501 y tipo-Tn1403, respectivamente; agregando así evidencias de que sitios res de transposones tipo-Tn3 son blancos de elección para la inserción de transposones tipo-Tn402, e.g. Tn6335. Aun así, resultados de ensayos de clonado y secuenciación mostraron la inserción del Tn6335 en cromosoma, en diferentes regiones del sitio res respecto a reportes de otros transposones tipo-Tn402, mostrando nuevos sitios blancos específicos de inserción.Los resultados en conjunto revelaron que plásmidos tipo-pLD209 constituyen el principal elemento de transferencia intra-específica de blaVIM-2 según su hallazgo entre clones pertenecientes a la misma especie, e.g. #LD209, y BA7816, correspondientes a P. grupo putida/IV; como de de transferencia inter-específica observado según el hallazgo en P. grupo putida/IV, P. grupo putida/II (HE1012), P. grupo putida/V (BA9605), y P. grupo putida/VII (LA111). Evidencias de eventos de transposición intra-específicos han sido observadas, derivadas del hallazgo del Tn6335 en cromosoma y en plásmido de aislamientos clonales de la misma especie, e.g. Tn6335 en las cepas clonales P. grupo putida/IV HP613 y LD209; respectivamente. Evidencias similares de portación de Tn6335 en cromosoma y en plásmido han sido observadas para cepas diferentes de la misma especie, e.g. P. grupo putida/II LA1008, P. grupo putida/II HE1012, respectivamente. El conjunto de resultados de este trabajo señalan la capacidad de diferentes especies de P. grupo putida para intercambiar plásmidos conjugativos (tipo-pLD209), y/o movilizar intra-genómicamente transposones completos portadores de blaVIM-2, constituyendo estas estructuras integrones/transposones, al presente escasamente reportadas, y quizás subestimadas como elementos genéticos de transferencia de genes en el género Pseudomonas. El hallazgo de un plásmido conjugativo en P. aeruginosa (diferente a los tipo-pLD209), portador del Tn6335 aporta evidencias de que especies de P. grupo putida, serían reservorios ambientales de genes de resistencia, y responsables de la transferencia de plataformas de resistencia a patógenos nosomiales (como P. aeruginosa). Estos resultados muestran que diferentes miembros de P. grupo putida pueden constituirse en un nexo entre bacterias ambientales y clínicas. La emergencia de cepas productoras de NDM, asociada a infecciones de elevadas tasas de morbi-mortalidad es actualmente una grave problemática de Salud Pública (Wu et al., 2019). En este contexto, la diseminación de blaNDM-1 en enterobacterias así como en Acinetobacter baumannii ha sido reportada profusamente (Dortet et al., 2016). Sin embargo, el rol de especies ambientales, e.g. A. bereziniae, como reservorios de genes de resistencia de impacto clínico no ha sido dilucidada y es materia de estudio en este trabajo. Se evaluó así la capacidad de una especie de Acinetobacter, infrecuentemente asociada a la clínica, para el ensamble de plataformas genéticas capaces de movilizar genes de resistencia a antimicrobianos (e.g. blaNDM-1) entre bacterias ambientales y patógenos nosocomiales. Asimismo, ha sido un objetivo específico la caracterización del contenido plasmídico de la cepa de A. bereziniae tomada como modelo de estudio, bajo la idea de dilucidar los elementos genéticos que facilitan la supervivencia de estas bacterias en diferentes nichos (ambiental/clínico). El aislamiento clínico HPC229, preliminarmente identificado como Acinetobacter lwoffii, fue caracterizado en base a los marcadores ARNr 16S, gyrB y rpoB, por lo cual fue reasignado a la especie A. bereziniae. La caracterización molecular de la plataforma portadora de blaNDM-1 en HPC229 mediante técnicas de biología molecular así como secuenciación mostró que blaNDM-1 se encuentra asociado al transposón compuesto Tn125, el cual a su vez se halla inserto en un plásmido no conjugativo, de 44 kpb, denominado pNDM229. Pudo reportarse así el primer aislamiento de A. bereziniae productor de NDM-1 en América y el segundo de esta especie reportada en el mundo (Brovedan et al., 2015). La comparación nucleotídica de pNDM229 contra plásmidos relacionados hallados en A. lwoffii y A. bereziniae (pNDM-BJ01 y pNDM-40-1, respectivamente) mediante herramientas bioinformáticas mostró que pNDM229 presenta semejante esqueleto plasmídico que dichos plásmidos, perteneciendo así al grupo de plásmidos denominados tipo-pNDM-BJ01 (Jones et al., 2015). Sin embargo, pNDM229 muestra características únicas, como el hallazgo de una segunda copia de tipo-ISAba14 corriente abajo del Tn125, por lo cual conformaría un transposón compuesto flanqueado por dos copias de ISAba14, lo cual podría proveer capacidad de movilizar no sólo a blaNDM-1, sino también a apha6, codificante de una aminoglucósido-acetiltransferasa; y deleciones en genes esenciales del Sistema de Secreción tipo IV (SST4) (e.g. virB8-virB11 y virD4) lo que explicaría la falla en la recuperación de transconjugantes. Bajo el objetivo de evaluar la diseminación de blaNDM-1 mediante plásmidos tipo-pNDM-BJ01 en el género Acinetobacter se realizaron estudios comparativos de la secuencia nucleotídica de pNDM229 contra bases de datos de Acinetobacter spp. Los resultados revelaron la existencia de 21 plásmidos tipo-pNDM-BJ01, y otros 5 plásmidos con esqueletos diferentes; reportados en numerosas especies de Acinetobacter. Entre estos últimos, la región de homología correspondiente a la región de adaptabilidad resultó ser el Tn125 o parte del mismo. El alineamiento de esta región para el conjunto de los plásmidos tipo-pNDM-BJ01 incluyendo pNDM229, reveló plataformas diferentes, que evidencian rearreglos genéticos. Estas variaciones incluyen esencialmente deleciones del Tn125, o bien adquisiciones de ISs, que conforman transposones compuestos potencialmente movilizables (e.g. ?Tn14? de pNDM229). Sin embargo, se presentan regiones conservadas en ambos extremos de la misma e involucra en el extremo 5? la estructura ISAba14-aphA6-ISAba125-blaNDM-1-ble; y en el extremo 3?, el gen codificante de la resolvasa TnpR así como una región intergénica de 160 nt corriente arriba del mismo. Por último, la búsqueda sistemática de estructuras ancestrales putativas en Acinetobacter spp. mostró regiones homólogas a ambas conservadas descriptas, en cepas de A. parvus y de A. pittii. Así, se propone un modelo hipotético que sugiere que la transposición del Tn125 sería una de las últimas etapas, la cual dio origen al plásmido pNDM-BJ01 detectado en A. lwoffii, a partir del cual derivan restantes plásmidos tipo-pNDM-BJ01 (como pNDM229). Este modelo aporta evidencias de que especies ambientales de Acinetobacter serían responsables del ensamble de estructuras potencialmente móviles (como plásmidos tipo-pNDM-BJ01), y por tanto agrega evidencias de que especies ambientales del género constituyen reservorios de genes de resistencia.La secuenciación y caracterización de plásmidos co-residentes con pNDM229 en la cepa clínica A. bereziniae HPC229 permitió distinguir regiones de replicación, estabilidad, transferencia y adaptabilidad en los plásmidos denominados pAbe229-114, pAbe229-15, pAbe229-9, pAbe229-4 y pAbe229-1 (por sus tamaños moleculares). Las comparaciones contra bases de datos mostraron que son plásmidos no reportados previamente. No obstante, regiones parciales fueron detectadas en diversos plásmidos de Acinetobacter spp., evidenciando así regiones expuestas a THG entre diferentes especies de Acinetobacter. El análisis de pAbe229-114 (114 kpb) reveló un esqueleto plasmídico similar al hallado en pAV3, derivado de una cepa ambiental de A. venetianus, dada la homología de las regiones de replicación y estabilidad. Sin embargo, pAbe229-114 presenta regiones únicas que incluyen un SST4 incompleto de elevado contenido GC (57%), lo cual sugiere su adquisición desde otro género bacteriano (e.g. P. stutzeri); y numerosos genes involucrados en la resistencia a metales pesados, a estrés oxidativo como así también a bacteriófagos. La detección de numerosos elementos genéticos incluyendo islas genómicas, ISs y transposones revelan una larga historia de rearreglos genéticos. La estructura general de los plásmidos pAbe229-15 (15 kpb) y pAbe229-9 (9 kpb) resultó ser semejante, constituyendo plásmidos movilizables dado que poseen una región de transferencia mobA-oriT. Aun cuando la región de adaptabilidad es característica para cada uno de ellos, ambos tienen en común numerosos sitios de recombinación XerC/D, bordeando módulos de replicación, transferencia y adaptabilidad, lo cual sugiere la movilización de dichas regiones por eventos de recombinación mediados por sitios XerC/XerD. El análisis de pAbe229-4 (4 kpb) mostró que, a pesar de no contener genes codificantes de replicasa y relaxasa, posee un sistema TA que le otorga estabilidad. Por su parte, el análisis de pAbe229-1 (1 kpb) reveló un plásmido de reducido tamaño sin características funcionales conocidas, y constituye el elemento de menor tamaño reportado al presente en Acinetobacter spp. La clasificación de los plásmidos de HPC229 se basó en la comparación de las secuencias aminoacídicas de las replicasas, así como también en los últimos 300 AA del extremo N-terminal de sus relaxasas. Las replicasas de pAbe229-114, pAbe229-15 y pAbe229-9 están incluidas dentro de los ?Acinetobacter Rep-3 Groups? (AR3G) descriptos, i.e. AR3G4, AR3G3 y AR3G6, respectivamente. Por otro lado, las relaxasas de pAbe229-15 y pAbe229-9 así como de pNDM229 se clasificaron en el subgrupo MOBQ1, mientras que la relaxasa de pAbe229-114 forma parte de un grupo filogenético diferente, MOBP111. Aun cuando ninguno de los plásmidos de HPC229 se muestra conjugativo según análisis in silico, la presencia de relaxasas en estos últimos sugiere su potencial movilización. Plásmidos portadores de blaNDM-1, como pNDM229 de la cepa local y pNDM-40-1 de la cepa clínica A. bereziniae CHI-40-1 han sido reportados. Sin embargo, al presente hay escasos datos del genoma accesorio de esta especie. En este contexto, se caracterizó aquí in silico el contenido plasmídico de genomas depositados de cepas de A. bereziniae. Para ello, se efectuó la búsqueda sistemática de marcadores plasmídicos en 7 genomas disponibles, así como de dos cepas aquí asignadas a esta especie mediante la herramienta bioinformática orthoANI (Acinetobacter Ag2 y WC-743). Se identificaron 16 replicasas, 7 en CHI-40-1; 4 EN 507_ABAU; 3 KCTC 23199; 2 en CIP 70.12; y 1 en WC-743, Ag2 y NIPH3, que agruparon en 11 de los 15 grupos caracterizados de AR3G, descriptos en Acinetobacter spp. Por otro lado, se detectaron 8 relaxasas, 6 en CHI-40-1, y 1 en 507_ABAU y WC-743, las cuales clasifican dentro de los grupos MOBQ1 y MOBQaci. Como resultado del análisis global, se destaca que las cepas clínicas portadoras de blaNDM-1, HPC229 y CHI-40-1, contienen elevado número de replicasas y relaxasas, mostrando la diversidad de plásmidos que albergan las únicas dos cepas clínicas MR de esta especie, con genomas completos (Jones et al., 2015; Brovedan et al., 2016). Por último, se realizaron búsquedas de sitios de recombinación XerC/D en los genomas de A. bereziniae bajo el objetivo de identificar módulos potencialmente intercambiables, bordeados por dichos sitios. Para ello, inicialmente se efectuó la búsqueda sistemática de dichos sitios en los plásmidos de HPC229, mostrando 5 en pAbe229-15; 4 en pAbe229-9; 2 en pAbe229-114; 1 en pAbe229-4; y ninguno en pNDM229. Diez de estos sitios tienen una región central (cr) de 6 nucleótidos de longitud lo que llevó a generar un consenso para los sitios XerC/D en A. bereziniae HCP229. Empleando este consenso, se identificaron luego 55 putativos sitios en los genomas de las cepas de la especie; 31 en CHI-40-1, 7 en 507_ABAU, 5 en Ag2, 4 en WC-743, 3 en KCTC 23199, y 2 en las cepas CIP 70.12 y NIPH3 y 1 en XH901. Los resultados mostraron que las cepas clínicas portadoras de blaNDM-1, CHI-40-1 y HPC229, son las que contienen mayor número de sitios. Estos resultados sumados a lo expuesto anteriormente sugieren una correlación entre cepas adaptadas al entorno hospitalario con la presencia de diversidad de plásmidos, así como numerosos sitios XerC/D en sus secuencias nucleotídicas que aportan plasticidad a módulos de plásmidos, y a plásmidos en sí mismos, para su intercambio y diseminación a través de recombinación sitio-específica y/o formación de cointegrados. Los resultados globales de la caracterización de los plásmidos de la cepa clínica A. bereziniae HPC229 muestran que la portación de una diversidad de elementos genéticos le permiten mayor adaptabilidad y supervivencia en diferentes hábitats incluyendo nichos ambientales como clínicos, constituyendo así esta especie un nexo probable entre diferentes grupos bacterianos.

Interferometría sísmica en volcanes Andinos: Caracterización y monitoreo del subsuelo; Seismic interferometry for Andean volcanoes: Characterization and monitoring of the subsurface Casas, José Augusto A lo largo de la historia, los sistemas magmáticos activos han demostrado tener la capacidad de generar impactos negativos en las poblaciones vulnerables situadas en sus cercanías. Cada año, aproximadamente 7% de la población mundial se ve afectada en mayor o menor medida por los diversos sucesos de origen volcánico. La comunidad científica y los gobiernos locales dirigen esfuerzos (políticos, económicos, recursos humanos) con la finalidad de paliar las posibles consecuencias adversas originadas por la actividad volcánica. El desarrollo de conocimiento sobre los mecanismos que conducen a la actividad observada, las estructuras subsuperficiales que intervienen, y la construcción de los escenarios futuros más probables, resulta fundamental para la eficiente aplicación de medidas de reducción de riesgo por amenazas volcánicas. La presente tesis doctoral representa una contribución al conocimiento de las condiciones físicas subsuperficiales de dos sistemas volcánicos andinos, el Complejo Volcánico Planchón-Peteroa (CVPP) y el Complejo Volcánico Cotacachi-Cuicocha (CVCC). Estos complejos volcánicos, si bien han sufrido grandes erupciones en el pasado, con destrucción de sus edificios volcánicos, flujos piroclásticos, y avalanchas, motivos de su elevada peligrosidad, actualmente poseen niveles de actividad moderados a bajos. El limitado nivel de riesgo de estos complejos ha motivado una escasa densificación de su instrumentación. El CVPP y el CVCC sugieren una oportunidad para la implementación de nuevas técnicas que exploten al máximo la información contenida en las señales sísmicas registradas en sus cercanías. Esta tesis propone entonces, la aplicación de distintas metodologías basadas en la técnica interferometría sísmica (IS) a registros adquiridos en el área del CVPP y del CVCC.Desde el año 2010, el CVPP es monitoreado por el Observatorio Volcanológico de los Andes del Sur (OVDAS), a través de las estaciones de la Red Nacional de Vigilancia Volcánica (RNVV-SERNAGEOMIN, Chile) desplegadas sobre el territorio chileno (red OVDAS); y recientemente por el Observatorio Argentino de Vigilancia Volcánica (OAVV-SEGEMAR, Argentina), a partir de la información adquirida por estaciones en suelo argentino. Esta información ha sido utilizada para la identificación de los diferentes tipos de señales y la estimación de la distribución espacial de sus fuentes sísmicas. Adicionalmente, durante el año 2012, seis estaciones sísmicas (red PV) fueron temporalmente (un año) instaladas por el proyecto MalARRgue sobre el flanco oriental del CVPP. En una etapa previa al presente trabajo de tesis, este mismo grupo de investigación ha utilizado los registros sísmicos de la red PV para caracterizar la actividad sismovolcánica del CVPP, realizar un análisis de atenuación sísmica en el área, y localizar los eventos sísmicos identificados; asimismo, ha utilizado la información otorgada por las redes PV y OVDAS para el refinamiento de la ubicación de los eventos de fractura registrados. El conocimiento de la disposición en el subsuelo de las fuentes de sismos locales representa un punto de partida para la aplicación de IS basada en autocorrelaciones de eventos locales seleccionados. Sus resultados proveen una estimación precisa de la profundidad de las discontinuidades con mayor contraste de impedancia sísmica debajo de cada una de las estaciones de las redes PV y OVDAS, hasta una profundidad de 4 km, demostrando una elevada correlación con la información geológica disponible para el área. Además, estos resultados sugerirían la presencia de zonas caracterizadas por una elevada heterogeneidad, así como de una zona de acumulación de material magmático en la región más occidental de análisis. Las interpretaciones realizadas refuerzan el modelo de subsuelo desarrollado por Benavente Zolezzi (2010) para el área del CVPP mediante análisis de fluidos termales y sensores remotos. Los resultados obtenidos resultan fundamentales para la futura aplicación de técnicas de modelado de la dinámica interna del sistema magmático.Con el objeto de extender la caracterización del subsuelo a mayores las profundidades, se utilizan los registros sísmicos adquiridos por las redes PV y OVDAS para la aplicación de IS mediante autocorrelaciones a sismos regionales, los que fueran seleccionados de acuerdo a su magnitud, localización, y ángulo de incidencia de la energía de onda P. La aplicación de esta metodología para tres rangos de frecuencias particulares permite interpretar la presencia de diversos rasgos (discontinuidades intracorticales, discontinuidad corteza-manto, techo y base del bloque subductante, zona de baja velocidad litosférica, discontinuidad litósfera-astenósfera, zona de baja velocidad astenosférica) del subsuelo debajo de las estaciones de las redes PV y OVDAS, así como la inferencia de las zonas de mayor probabilidad de acumulación de material fundido en la corteza. La información sísmica registrada por las estaciones de la red PV es utilizada para la extracción y análisis de la información de ondas superficiales contenidas en el ruido sísmico ambiental, logrando mejorar la resolución de los modelos de velocidad en sus primeras capas. Para ello, se utilizan ventanas temporales seleccionadas de acuerdo a su correspondencia con señales de fuentes ubicadas en las áreas de fase estacionaria para cada par de estaciones, en el rango de frecuencias [0.8, 4] Hz. Construidas las curvas de dispersión, se prosigue a la obtención de los perfiles de velocidad de onda S, las cuales sugieren la presencia de 2 capas bien diferenciadas en los primeros 350 m del subsuelo. La distribución espacial de velocidades de onda S permite una interpretación de los posibles factores (litología, porosidad, contenido de agua) que condicionan este comportamiento. Los resultados obtenidos de la aplicación de IS mediante autocorrelaciones a eventos seleccionados, en integración con los obtenidos de la IS por correlaciones de ruido sísmico ambiental, permiten, por un lado, precisar la profundidad de los elementos relevantes a la tectónica regional (litósfera continental, astenósfera, bloque subductante) hasta una profundidad de 400 km, y, por otro lado, elaborar un modelo de subsuelo volcánico a niveles corticales, el cual posibilita la identificación de las zonas de mayor probabilidad de acumulación de fundido magmático. El CVCC ha sido monitoreado por el Instituto Geofísico de la Escuela Politécnica Nacional (IGEPN, Ecuador) desde el año 1988, a partir del despliegue de la primera estación sismológica, dada la clasificación de este complejo volcánico como potencialmente activo. Hacia el año 2010 el CVCC mostró un incremento de su actividad, lo que condujo a la instalación de tres estaciones sismológicas adicionales. Las señales sísmicas registradas por la red de monitoreo del CVCC son utilizadas, en el marco de esta tesis, para la aplicación de una novedosa variación de IS, basada en la correlación de los registros de las componentes de una misma estación. Esta metodología manifiesta la ausencia de cambios significantes en el CVCC durante el periodo de registro analizado, coincidente con la fenomenología observada en superficie y la evidencia científica disponible. La misma permite describir, además, el efecto de la inestabilidad temporal de las fuentes sobre la precisión de cálculo de las variaciones de velocidad subsuperficiales, constituyendo un marco de referencia para su aplicación durante periodos de mayor actividad volcánica. Esta aplicación, a su vez, refuerza la utilización de las correlaciones entre componentes distintas de una misma estación para la descripción precisa de la evolución de las condiciones subsuperficiales. La presente tesis doctoral logra suministrar información fundamental sobre las condiciones subsuperficiales del CVPP y el CVCC, evidencia científica que no solo demuestra la versatilidad de las técnicas de IS en sistemas geodinámicos complejos (como lo son las zonas volcánicas), sino que permite obtener resultados de utilidad para las metodologías de monitoreo orientadas a la estimación y reducción del riesgo de origen volcánico en las áreas del CVPP y el CVCC.

Historia de las concepciones de inteligencia en la Argentina (1900-1946) Molinari, Victoria Esta tesis está dedicada al estudio histórico de las diferentes concepciones de la categoría psicológica “inteligencia” y los usos que se hicieron de esta categoría en los campos de la educación, la psiquiatría, la criminología y la medicina social. El tema de investigación forma parte de los estudios de historia de la psicología, y se focaliza en los diversos cruces disciplinares dentro de los cuales se inscribió el problema de la medición de inteligencia y las consecuencias que ello tuvo para su conceptualización. El marco teórico-metodológico articula el enfoque de la historia crítica de la psicología con una perspectiva de historia intelectual, estudios de recepción y de circulación del conocimiento. El período estudiado se inicia en el año 1900 dado que a comienzos del siglo XX la psicología en la Argentina comenzó a desarrollarse como disciplina académica a partir de la creación de cátedras y laboratorios en distintas universidades. Culmina en 1946, ya que nos proponemos estudiar la conceptualización de la categoría inteligencia antes de su auge en relación con la orientación profesional y, fundamentalmente, antes de la creación de las carreras de psicología en la década del ‘50. A lo largo del período de indagación aquí propuesto analizamos las transformaciones que sufrió esta categoría a partir de los objetivos que tenían los expertos al resolver problemas específicos dentro de su área de trabajo y de la relación de estos problemas con proyectos más amplios de orden social. Entre otros, pueden mencionarse los problemas ligados a la conformación de una nacionalidad; la identificación de los niños que no se adaptaban al sistema escolar; la definición y tratamiento de anomalías mentales que no representaban una total alienación mental; los problemas de la criminalidad como una manifestación de un nivel intelectual bajo; y propuestas de organización social en base a las capacidades intelectuales. Sostenemos que, mediante la universalización y la naturalización de la categoría de inteligencia, se delineaban espacios de inclusión y exclusión de las poblaciones clasificadas según las graduaciones o los tipos de inteligencia. En este sentido nos servimos de las categorías de raza, clase y género para realizar un análisis valorativo de una categoría que se pretendía científicamente neutra. Este estudio busca contribuir a las investigaciones históricas de la psicología y de las disciplinas que utilizaron saberes psicológicos tales como la educación, la psiquiatría, la criminología y la medicina del trabajo.

Control Oriented Models with intra-patient variations for artificial pancreas systems; Modelos Orientados para Control Incluyendo Variaciones Intrapaciente para Sistemas de Pancreas Artificial Moscoso Vásquez, Hilda Marcela En los últimos años se ha incrementado el número de investigaciones orientadas al desarrollo de un Páncreas Artificial (AP) para la regulación automática de glucosa en pacientes con Diabetes Mellitus Tipo 1 (T1DM). Sin embargo, el riesgo de hiper- e hipoglucemia sigue siendo un impedimento para una regulación adecuada de la glucemia en algunos casos. Una fuente importante de limitaciones se origina a partir de la incertidumbre del modelo, y la alta variabilidad inter- e intra-paciente que afecta la dinámica de la regulación de la glucosa. Por lo tanto, considerando que se requieren herramientas para el diseño de estrategias de control robustas y variables en el tiempo que permitan considerar estos aspectos, esta tesis se centra en desarrollar modelos que permitan integrarlos en la etapa de diseño del controlador. Con el fin de caracterizar las variaciones intra-paciente en sujetos con T1DM, se realiza una revisión de su origen y la fisiología subyacente relacionada con esta variabilidad, obteniendo un resumen de las variables que afectan los requerimientos diarios de insulina de cada paciente. Además, se analizan los enfoques para modelado/simulación de las variaciones de sensibilidad a la insulina (SI) y las diferentes maneras en las que se han tenido en cuenta estas variaciones en los modelos orientados a control. En el marco del control robusto, se obtienen diferentes modelos orientados al control de T1DM incluyendo las variaciones en SI . Primero, a partir de un modelo lineal de parámetros variantes (LPV) desarrollado previamente, usando técnicas de invalidación, un conjunto de modelos de bajo orden capaz de“cubrir”las variaciones intra-pacientes con límites de incertidumbre dinámica. Este conjunto de modelos es fundamental para el diseño de controladores robustos que garanticen estabilidad y desempeño. En segundo lugar, se incluyen variaciones intra-pacientes durante la etapa de identificación del modelo, lo que permite integrarlas dentro de una estructura LPV de bajo orden adecuada para el diseño de controladores LPV. La eficacia de este nuevo modelo se evalúa de la siguiente forma. Por un lado, se computa el error cuadrático medio (RMSE) entre las desviaciones de glucosa predichas por los modelos LPV con y sin variaciones intra-paciente y el simulador. Por otro lado, se miden las distancias entre ambos modelos y el simulador a través del -gap, a fin de determinar las diferencias de desempeño a lazo cerrado. Finalmente, se desarrolla un modelo LPV que permite dar cuenta de los efectos de la hiperglucemia/hiperinsulinemia en la sensibilidad a la insulina y su efectividad se evalúa nuevamente en lazo abierto y lazo cerrado.; Research on the development of a closed-loop artificial pancreas for automatically regulating theblood glucose level in Type 1 Diabetes Mellitus (T1DM) patients has intensified in the past years.However, the risk of hyper- and hypoglycemia remains an impediment to adequate glycemic control in some cases. A significant source of limitations originates from model uncertainty, and the extremely high inter- and intra-patient variability that affects the dynamics of glucose regulation. Therefore, considering that tools are required for the design of robust and time-varying control strategies that consider these issues, this thesis focuses on developing control-oriented models that allow considering them in the controller design stage.In order to characterize intra-patient variations in T1DM, a review of the sources and underlying physiology related to intra- and inter-day variability is made, obtaining a summary of the variables affecting daily insulin requirements. Moreover, modeling/simulation approaches of Insulin Sensitivity (SI) variations that have been adapted for T1DM are analyzed. Additionally, the different ways they have been accounted for in control-oriented models are reviewed.Following a robust control framework, different control-oriented models including variations in SI are obtained. First, invalidation techniques are applied to a previous linear parameter varying (LPV) model to develop a set of low-order LPV models that\covers"intra-patient variations with dynamic uncertainty bounds. This model set is instrumental for obtaining robust controllers that guarantee stability and performance. Secondly, intra-patient variations are included during the model identification stage to embed them within a low-order LPV model structure that is amenablefor LPV controller design. The performance of this new model was evaluated in comparison with the previous LPV model without intra-patient variations in terms of their open- and closed-loop differences with the UVA/Padova model. In open-loop, the analysis is made through the Root Mean Squared Error (RMSE) between the glucose deviation predicted by the models and the UVA/Padova simulator. In closed-loop, the nu-gap metric was used, which measures the distance,in terms of performance, between two models. Finally, an LPV model that allows to account for the effects of hyperglycemia/hyperinsulinemia on insulin sensitivity is developed and evaluated both in open- and closed loop.

Soluciones exactas y aproximadas a problemas de frontera libre de tipo Stefan con calor latente variable Bollati, Julieta En esta Tesis, se hallan soluciones exactas de tipo similaridad a diferentes problemas de tipo Stefan sobre medios unidimensionales semi-infinitos, homogéneos e isotrópicos con la característica principal de considerar calor latente variable, el cual en caso clásico es considerado constante. Además, se obtienen aproximaciones a algunos de estos problemas, mediante métodos de balance integral. Se testea la exactitud de las soluciones aproximadas mediante su comparación con la solución exacta.En una primera instancia, se presentan dos problemas de tipo Stefan con calor latente variable, definido como una potencia no negativa de la posición y con una condición de tipo Robin en el borde fijo del material: el primero a una fase y el segundo a dos fases. Se determinan soluciones de similaridad utilizando las funciones de Kummer. Se estudian las condiciones sobre los datos del problema a una fase, para que el mismo resulte equivalente al problema que posee una condición de Dirichlet o Neumann, en vez de la de Robin, en el borde fijo. Tanto para el problema de Stefan a una fase como para el de dos fases, se analiza el comportamiento límite cuando el coeficiente que caracteriza la transferencia de calor en el borde fijo tiende a infinito. Se muestran también diferentes ejemplos numéricos. Luego, se generalizan los resultados obtenidos, estudiando problemas de tipo Stefan con calor latente dependiente no solo de una potencia de la posición sino también de una potencia de la velocidad. De manera análoga, se resuelven los problemas con condiciones de temperatura, flujo o convectiva en el borde fijo, mediante el método de similaridad. Para el caso convectivo, se realiza un estudio del comportamiento límite de la solución cuando el coeficiente que caracteriza la transferencia de calor en el borde fijo tiene a infinito. Se proveen ejemplos computacionales para el cálculo de la frontera libre y el calor latente variable en el tiempo.Por último, se presentan aproximaciones para el problema de Stefan a una fase con calor latente dependiente de la posición y condiciones de tipo Dirichlet o Robin en el borde fijo. Para obtener dichas aproximaciones se utiliza el método de balance integral clásico, una variante del mismo, y el método de balance integral refinado. Se comparan las distintas aproximaciones con la solución exacta y se calculan los errores relativos porcentuales que se cometen en cada método.

Estudio de inhibidores peptídicos de proteasas aislados de alimentos de origen vegetal: potenciales aplicaciones como agentes anticoagulantes, anti-infectivos naturales y capacidad protectora del Factor de Crecimiento Epidérmico Cotabarren, Juliana Los Inhibidores de Proteasas (IPs) son moléculas que se utilizan para el control y la regulación de la actividad de las proteasas. Los IPs constituyen importantes herramientas de la naturaleza para el control de la actividad proteolítica de sus proteasas blanco, así como su bloqueo en casos de actividad exacerbada y descontrolada. Se presentan en múltiples formas, en numerosos tejidos de animales, plantas y microorganismos. Los IPs participan en la prevención de la proteólisis no deseada y, por tanto, están involucrados en la mayoría de los procesos fisiológicos normales, al igual que en los procesos patológicos, debido a su implicación en la regulación de la actividad proteolítica, la activación de coenzimas y la liberación de polipéptidos biológicamente activos. El objetivo general de esta Tesis consiste en la búsqueda de nuevos inhibidores peptídicos de proteasas de origen vegetal, su aislamiento, purificación y caracterización cinética, proteómica, molecular y bioquímica, haciendo hincapié en la búsqueda de nuevas actividades biológicas tales como actividad antimicrobiana, antioxidante y anticoagulante, recientemente descubiertas para este tipo de moléculas. Adicionalmente se evaluó la actividad protectora de estos nuevos inhibidores frente al factor crecimiento epidérmico (EGF, de sus siglas en inglés Epidermal Growth Factor), con la finalidad de generar una disminución en la degradación de dicha molécula provocada por las proteasas mayoritarias presentes en las úlceras de pie diabético. En el Capítulo 1 se presenta una introducción general de los inhibidores peptídicos de proteasas, su naturaleza, abundancia y aplicaciones en el ámbito de la biotecnología y de la biomedicina. También se describe el objetivo general y los objetivos específicos de la Tesis. El Capítulo 2 se divide en dos grandes partes que abarcan prácticamente la totalidad de la Tesis. En la primera parte del Capítulo 2 se presenta el aislamiento y caracterización de un nuevo inhibidor de carboxipeptidasa A; proveniente de una variedad de papa andina (Solanum tuberosum subsp. andigenum cv. Imilla morada), el primer inhibidor clonado en esta especie, el cual fue expresado de forma recombinante y ensayado frente al EGF, encontrando resultados interesantes de actividad protectora (resultados que se presentan en el Capítulo 4). En la segunda parte del Capítulo 2, se presenta un nuevo inhibidor de carboxipeptidasa A, proveniente de morrón amarillo (Capsicum annuum L.), purificado mediante cromatografía de afinidad y caracterizado bioquímicamente, encontrando también resultados promisorios para investigaciones futuras teniendo en cuenta que este inhibidor (YBPCI) presenta una marcada estabilidad a elevadas temperaturas, a pHs extremos y a altas fuerzas salinas, así como también notable estabilidad bioquímica frente a ensayos de simulación gástrica in vitro (Capítulo 2 – Parte 2). En el Capítulo 3 se describe la purificación y caracterización bioquímica del primer inhibidor de papaína proveniente de Moringa oleifera, observándose interesantes actividades biológicas con aplicaciones medicinales, principalmente actividad anticoagulante y actividad antimicrobiana frente a bacterias patógenas. En el Capítulo 4 se desarrolla el análisis bioinformático de la estructura del EGF, con el fin de diseñar una estrategia de mutagénesis sitio-dirigida que permita la producción de un EGF mutante con resistencia a la proteólisis. Este capítulo se encuentra en etapa de investigación, ya que al haber hallado actividad protectora con el inhibidor de carboxipeptidasa aislado de papas andinas en el Capítulo 2 – Parte 1 (rimaPCI), la investigación fue desviada a la búsqueda de nuevos inhibidores que presenten dicha actividad. En el último capítulo, Capítulo 5, se presentan las conclusiones más relevantes obtenidas a lo largo de la Tesis. Se describen además, las líneas de investigación que se originan a partir de este trabajo de tesis doctoral y en las que deberían orientarse las investigaciones futuras de nuestro grupo.

Evaluación de aislado proteico de amaranto como fuente de péptidos antioxidantes: estudios in vitro e in vivo García Fillería, Susan Fiorella El estrés oxidativo se ha relacionado con una gran variedad de enfermedades crónicas no transmisibles y muchos de los procesos así como los cambios generados a nivel celular se pueden utilizar como biomarcadores del mismo. Por otro lado, se ha demostrado la presencia en la semilla de amaranto de péptidos bioactivos con capacidad antioxidante principalmente mediante ensayos in vitro. El objetivo de este trabajo fue profundizar el estudio de aislado proteico de amanto como fuente de péptidos antioxidantes mediante estudios ex vivo, in vitro celulares e in vivo. Para la obtención de los péptidos antioxidantes se utilizó un método estático simplificado de simulación de la digestión gastrointestinal sobre el aislado proteico de amaranto que fue comparado con un método internacionalmente consensuado cuyo procedimiento presento algunas diferencias con respecto al método simplificado: presencia de una fase oral además de la gástrica y la intestinal, composición más completa de fluidos simulados, diferentes valores de pH así como de concentración de enzimas y de tiempo de contacto enzima/proteína. Los aislados digeridos por ambos métodos presentaron características similares en cuanto al grado de hidrolisis (TNBS), el contenido de proteína total y soluble (microKjeldahl y lowry), el perfil electroforético (SDS-PAGE y Tricina SDS-PAGE) y las actividades antioxidantes evaluadas por el método de ORAC y HORAC. Los aislados digeridos también se evaluaron mediante cromatografía de exclusión molecular, obteniéndose perfiles similares, y se separaron las fracciones correspondientes según su masa molecular. Las fracciones de los distintos digeridos también presentaron similar comportamiento al evaluar su actividad antioxidante (ORAC y HORAC). De esta forma se pudo reafirmar la utilización del método simplificado en la obtención del aislado digerido y de sus fracciones en los ensayos posteriores. Además, se caracterizaron 10 péptidos sintéticos derivados del aislado digerido a partir de su actividad antioxidante (ORAC y HORAC) y a partir de ensayos in sílico a fin de incorporar información sobre características fisicoquímicas y de interacción con al célula. Se evaluó el efecto antioxidante del aislado digerido, de sus fracciones y de los péptidos sintéticos por distintas metodologías.Todas las muestras presentaron un efecto en la prevención de la oxidación de las LDL (proceso que tiene importancia en el desarrollo de la enfermedad cardiovascular) evaluada mediante: tiempo de inducción y velocidad de propagación de la formación de dienos conjugado (DC) y de compuestos fluorescentes (CF), presencia de sustancias reactivas al TBA (TBARS) y movilidad electroforética de LDL. Las fracciones más activas fueron las correspondientes a masas moleculares entre 0,52-1,4 kDa (F23-F29) y los péptidos sintéticos P3, P7 y P10 (carga negativa e hidfrofílico, carga positiva e hidrofóbico y carga positiva e hidrofílico respectivamente). Se encontró una falta de correlación entre los valores de actividad antioxidante por los métodos in vitro en solución de estos tres péptidos (ORAC y HORAC) con los resultados obtenidos en la prevención de la oxidación de las LDL probablemente debida a que la molécula de LDL es más compleja y está en dispersión por lo que pueden entrar en juego otros factores como concentración, interacciones y cambios conformacionales. Se determinó la actividad antioxidante intracelular mediante cultivos celulares de Caco-2 TC7 que fueron incubados en primer lugar con las muestras y luego sometidos a inducción de la oxidación con H2O2 o AAPH. Posteriormente se evaluó el efecto de las muestras sobre la inhibición de la formación de ROS intracelulares (mediante el uso de la sonda diacetato de 2´7´-diclorodihidrofluoresceína) y sobre la actividad de las enzimas antioxidantes: superóxido dismutasa (SOD), glutatión peroxidasa (GPx) y sobre el contenido de glutatión reducido (GSH), antioxidante endógeno celular no enzimático. También se evaluó el efecto sobre la oxidación de lípidos celulares mediante el ensayo de TBA y sobre el daño a nivel mitocondrial y de membrana plásmatica por doble marcación con ioduro de propidio y rodamina 123 y citometría de flujo. Todas las muestras, evaluadas, con excepción de P8 y P9 presentaron una disminución parcial o al estado basal de oxidación celular del contenido de ROS mientras que se encontraron varios comportamientos en cuanto a las actividades enzimáticas y el contenido de GSH (aumento, disminución o sin efecto). Se encontró menor efecto en el contenido de TBARS y ningún efecto en la prevención del daño mitocondrial y de membrana plásmatica. Al evaluar los controles de oxidación máxima por inducción y de oxidación basal para todos los ensayos, en líneas generales no se encontró un estado de oxidación importante que pueda haber sido dañino. P8 presentó valores altos de inhibición de ROS por métodos in vitro acelulares (ORAC y HORAC) mientras que no presentó efecto en la inhibición de ROS intracelular. Paralelamente, ocurrió lo contrario para P6 y P10. Esta falta de correlación entre ensayos acelulares y celulares puede deberse a que los péptidos en cuestión sufren modificaciones en presencia de las células que cambian la actividad o que ejercen su acción por mecanismos distintos a la neutralización directa de las ROS. Por otro lado se evaluó la absorción de las muestras al ser puestas en contacto con monocapas de células Caco-2 TC7 en insertos de policarbonato que simulan la pared intestinal y las posibles modificaciones que pueden ocurrir durante el proceso debido a las peptidasas del borde en cepillo. Se encontró en algunos casos modificaciones diversas y pasaje a través de la monocapa de productos así como absorción de componentes originales (sin modificar). Varias muestras presentaron algún grado de resistencia a la modificación por peptidasas y dado que varias presentaron buenos valores de inhibición de ROS podrían ejercer su efecto en las celulares intestinales previniendo patologías asociadas a esta. P3 y F28 que habían presentado efectos en la prevención de la oxidación de las LDL resistieron (parcial o totalmente) la degradación por peptidasas por lo que podrían atravesar la pared intestinal y ejercer su efecto sobre estas partículas. Por último se evaluó el efecto de la incorporación de aislado proteico de amaranto en las dietas de ratas wistar. Se utilizó como controles una dieta básica recomendada para el mantenimiento de estos animales (C), una dieta con el agregado de colesterol y grasa porcina (COL+G), con el objetivo de inducir el estrés oxidativo en los animales y una dieta con el agregado de colesterol, grasa y vitamina E como antioxidante conocido (COL+E+G). La administración del amaranto se hizo junto al agregado de colesterol y grasa, en forma crónica y aguda; en la primera dieta se administró el aislado en menor concentración durante más tiempo, COL+G+A1 (reemplazo del 25 % de caseína, durante 4 semanas) y en el segundo caso se realizó en mayor concentración durante menos tiempo COL+G+A2 (3 semanas de COL+G y 1 semana de la dieta con reemplazo del 50 % de caseína). Después del sacrificio se recolectó el plasma, el colon y el hígado y se evaluaron diferentes parámetros del estrés oxidativo. Al evaluar los resultados obtenidos para los controles no se logró evidenciar un estado de estrés oxidativo en los parámetros evaluados lo cual podría deberse al tipo de grasa utilizada o al tiempo de administración de las dietas. A pesar de esto se pudieron encontrar algunos efectos como resultado de la incorporación de aislado de amaranto en las dietas siendo la administración aguda la que presentó mayor efecto: para la administración crónica se encontró un mayor aumento de la capacidad reductora del plasma y menor contenido de GSH en hígado, mientras que para la dieta aguda, se encontró además de estos mismos efectos, menor contenido de GSH en colon y menor actividad de GPx en hígado. Estos resultados demostraron que durante la digestión del aislado se liberaron productos que lograron absorberse y lograr los efectos mencionados. A partir de los resultados obtenidos en este trabajo se reafirmó que el aislado proteico de amaranto es fuente de péptidos bioactivos antioxidantes y que puede ejercer su efecto biológico a distintos niveles y a partir de diferentes mecanismos. Se plantea como objetivo poder desarrollar una formulación que contenga al aislado de amaranto como ingrediente y evaluar efectos de la matriz y procesamientos sobre la biodisponibilidad y bioactividad de los péptidos así como el posible desarrollo de matrices o vehículos conteniendo alguno/s de los péptidos para lograr una acción en un sitio específico.

Sistemas avanzados para dosimetría de radiación ionizante Vedelago, José Alberto Los tratamientos con radiación contra el cáncer han evolucionado con el objetivo de aumentar su eficiencia y en busca de favorecer la recuperación de los pacientes. La complejidad de estos tratamientos de radioterapia impone requisitos rigurosos a los sistemas de dosimetría de radiación ionizante, siendo los más importantes las propiedades de tejido-equivalencia y la capacidad de realizar estimaciones tridimensionales. Por ello, es necesario contar con sistemas avanzados de dosimetría no convencional, que permitan satisfacer los requerimientos dosimétricos actuales.Con ese objetivo, se desarrollaron e investigaron materiales y metodologías para realizar mediciones dosimétricas en técnicas de radioterapia novedosas, apuntando a resolver situaciones que no pueden ser solucionadas por sistemas tradicionales o que lo hacen de manera parcial.Estos sistemas fueron utilizados para realizar determinaciones dosimétricas experimentales en campos de radiaciones complejos y las mediciones de los sistemas avanzados se compararon con sistemas tradicionales como la cámara de ionización. También se llevaron a cabo comparaciones con el sistema de planificación de tratamiento que se utiliza para el tratamiento de pacientes.Para terapias en fase de investigación que requieren dosimetría en campos mixtos de radiación gamma y neutrones, se realizaron modificaciones de dosímetros avanzados que permitieron estimar la contribución de cada tipo de radiación a la dosis total. Con el objetivo de efectuar determinaciones dosimétricas en terapias más novedosas que involucran diagnóstico y tratamiento en simultáneo, llamadas teranósticas, se desarrolló un sistema de dosimetría avanzada, que permite realizar monitoreos en línea y cuantificar potenciales refuerzos de dosis en los tratamientos.En todos los casos, los resultados fueron contrastados con simulaciones Monte Carlo para contar con validaciones independientes de las mediciones y con mecanismos de predicción de las diferentes situaciones estudiadas.Por último, se implementaron herramientas para obtener comparaciones cuantitativas en una, dos o tres dimensiones de las distribuciones de dosis medidas, contrastándolas con las distribuciones obtenidas por sistemas dosimétricos convencionales o por medio de simulaciones Monte Carlo.

Concentración y resistencias en la producción hortícola del oasis norte y centro de Mendoza: Argentina Carballo Hiramatsu, Oscar Alberto Este trabajo se centra en las transformaciones sociales ocurridas desde la última década del pasado siglo a la actualidad en la horticultura de Mendoza. A pesar que Mendoza es la tercera provincia más importante en cuanto a producción de hortalizas del país, esta actividad ha sido muy poco abordada en los estudios sociales. La mayoría de los trabajos referidos a la misma se han llevado a cabo en la denominada área hortícola bonaerense. A partir de ellos se pudo establecer la presencia de intensos procesos de transformación tecnológica y social. Estos trabajos dieron cuenta de un importante proceso de adopción tecnológica a partir de la última década del pasado siglo, que desencadenó a su vez una fuerte diferenciación social entre una, hasta entonces, relativamente homogénea mayoría de pequeños y medianos productores. Esta dinámica incluyó fenómenos de expulsión y reproducción ampliada, pero también procesos de recomposición campesina protagonizados por inmigrantes bolivianos. Frente a estos antecedentes, en esta tesis nos preguntamos acerca de las formas específicas que adoptan las tendencias del desarrollo del capitalismo en la horticultura local. Los objetivos específicos que orientaron nuestro trabajo fueron comprender los mecanismos de acumulación y concentración del capital como así también los procesos de transformación social y espacial que desencadenaron en esta actividad en el período. De esta forma intentamos contribuir a la construcción de una imagen que dé cuenta no solo de las transformaciones productivas sino también de las formas de reestructuración que provoca la expansión del capital y de las formas de resistencias que ello genera. Para responder a estos interrogantes recurrimos a un diseño metodológico que combina el análisis de datos secundarios documentales y censales con un abordaje cualitativo basado en el análisis de entrevistas en profundidad. El trabajo se plantea de una forma comparativa entre dos zonas de producción hortícola con características diferenciales dentro de la provincia de Mendoza; por un lado el Oasis Centro, denominado Valle de Uco, con un perfil especializado en hortalizas “pesadas” y por otro lado el Oasis Norte con un perfil de cultivos hortícolas más diversificados, sobre todo en la periferia de la ciudad de Mendoza, zona conocida como cinturón verde. La tesis se divide en cinco capítulos, en el primero de ellos realizamos un recorrido histórico del desarrollo de la horticultura en la provincia en estrecha vinculación con los diferentes modelos de desarrollo nacional durante el pasado siglo. En el segundo capítulo, realizamos un análisis de los procesos de concentración en la actividad y los procesos espaciales y de cambios en el proceso de trabajo. El tercer capítulo está dedicado al análisis de las empresas capitalistas a partir de sus características productivas y comerciales, pero además indaga en los factores que inciden en las trayectorias de estas empresas. El cuarto capítulo se enfoca en los trabajadores asalariados y aparceros/chacareros. Allí analizamos las formas de inserción laboral y las condiciones que implican para estos trabajadores. El Capítulo 5 se enfoca en las condiciones y prácticas de reproducción de los horticultores campesinos y en los fenómenos de diferenciación y descomposición/recomposición social en dicho contexto.; This work focuses on the social transformations that have occurred since the last decade of the last century to the present in the horticulture of Mendoza. Although Mendoza is the third most important province in terms of vegetable production in the country, this activity has been very little addressed in social studies. Most of the works referred to it have been carried out in the so-called Buenos Aires horticultural area. From them it was possible to establish the presence of intense processes of technological and social transformation. These works gave an account of an important process of technological adoption since the last decade of the last century, which in turn triggered a strong social differentiation between a hitherto relatively homogeneous majority of small and medium producers. This dynamic included phenomena of expulsion and extended reproduction, but also processes of peasant recomposition carried out by Bolivian immigrants. Against this background, in this thesis we ask ourselves about the specific forms adopted by the tendencies of the development of capitalism in local horticulture. The specific objectives that guided our work were to understand the mechanisms of accumulation and concentration of capital as well as the processes of social and spatial transformation that unfolded in this activity in the period. In this way we try to contribute to the construction of an image that not only accounts for the productive transformations but also for the forms of restructuring caused by the expansion of capital and the forms of resistance that this generates. To answer these questions, we resort to a methodological design that combines the analysis of secondary documentary and census data with a qualitative approach based on the analysis of in-depth interviews. The work is presented in a comparative way between two zones of horticultural production with differential characteristics within the province of Mendoza; on the one hand the Oasis Center, called Valle de Uco, with a profile specialized in "heavy" vegetables and on the other hand the North Oasis with a profile of more diversified horticultural crops, especially in the periphery of the city of Mendoza, known area like green belt. The thesis is divided into five chapters, in the first of them we conducted a historical tour of the development of horticulture in the province in close connection with the different models of national development during the past century. In the second chapter, we conducted an analysis of the processes of concentration in the activity and spatial processes and changes in the work process. The third chapter is devoted to the analysis of capitalist companies based on their productive and commercial characteristics, but also explores the factors that affect the trajectories of these companies. The fourth chapter focuses on salaried workers and sharecroppers / chacareros. There we analyze the forms of labor insertion and the conditions they imply for these workers. Chapter 5 focuses on the conditions and practices of reproduction of the peasant horticulturists and on the phenomena of differentiation and decomposition / social recomposition in that context.

Relación entre la estructura y la función de M6a: endocitosis y reciclado Garcia, Micaela Daiana La glicoproteína de membrana M6a se encuentra asociada a enfermedades neuropsiquiátricas como la depresión, la esquizofrenia y fallas en el aprendizaje. Se ha descripto que contribuye positivamente en la extensión de neuritas, el crecimiento axonal la formación de filopodios/espinas y el mantenimiento de las sinapsis. M6a posee cuatro pasos de transmembrana, dos bucles extracelulares, uno mayor (EC2) y uno menor (EC1) y los extremos citoplasmáticos hacia el interior celular. Dos cisteínas presentes en su EC2, que forman un puente disulfuro, mostraron ser esenciales para el reconocimiento antigénico del anti-M6a-mAb. Este anticuerpo fue descripto como neutralizante porque ha sido capaz de bloquear la extensión de neuritas mediada por M6a. Por otro lado, se ha determinado, por coinmunoprecipitación, que M6a interactúa directa o indirectamente con clatrina. Sin embargo, el mecanismo preciso por el cuál M6a se internaliza y se recicla aún no ha sido dilucidado. En este trabajo, utilizando ensayos in vitro controlados estudiamos la inmunointernalización de M6a mediada por el anti-M6a-mAb. Observamos que luego de una hora de tratamiento parte de M6a se endocita y disminuyen significativamente el número de sinapsis en neuronas de hipocampo. Cuando los niveles de M6a en la superficie celular se reestablecen, observamos que el número de sinapsis recobra sus valores normales. La internalización de M6a involucra a endosomas tempranos revestidos de clatrina. Probablemente ésta ocurra por la asociación entre la proteína adaptadora 2 y el “motivo basado en tirosina” 251YEDI254 ubicado en el extremo C-terminal de M6a. Luego de su endocitosis, M6a es dirigida hacia endosomas tempranos característicos, Rab5- y EEA1-positivos. Posteriormente es dirigida o bien hacia la membrana a través de endosomas Rab11 positivos o bien hacia la vía degradativa mediada por endosomas Rab7 y LAMP-1 positivos. Nuestros resultados muestran que los niveles de M6a en la superficie celular neuronal modifican la formación y mantenimiento de las sinapsis, sin alterar los niveles de proteicos de las proteínas sinápticas estudiadas (sinaptofisina y el receptor de alta afinidad por glutamato, N-metil-D-aspartato receptor tipo 1). Este mecanismo novedoso podría ser relevante durante el desarrollo neuronal, el podado sináptico y/o podría estar involucrado en diversos desórdenes neurológicos en donde la sinapsis se encuentra comprometida.; The neuronal glycoprotein M6a has been associated with psychiatric disorders such as, depression, learning disabilities and schizophrenia. In cultured neurons, M6a positively contributes to neurite extension, axon guidance, filopodia/spine outgrowth, and synapse formation. The endocytic processes of neuronal membrane proteins are linked to the differentiation, growth, signalling and plasticity of neurons. However, the roles of M6a and the precise mechanisms through which M6a internalizes and recycles back to the neuronal membrane are unknown. Here, by using a controlled in vitro assay, we showed whether M6a is endocytosed, the number of synapses in hippocampal neurons decreases. When re-establishing the levels of M6a at the cell surface, the number of synapses returned to its normal values. M6a internalization involves clathrin-coated pits, probably by the association between the adaptor protein 2 and the 251YEDI254 “tyrosinebased” motif located within the C-tail of M6a. Upon endocytosis, M6a is sorted to early endosome antigen 1- and Rab5-positive endosomes and, then sorted back to the cell surface via Rab11-positive endosomes or to degradation via Rab7 and, finally LAMP-1- positive endosomes. Our results demonstrated that the levels of M6a at the cell surface modified the formation/maintenance of synapses, without altering the protein levels of synaptophysin or N-methyl-D-aspartate receptor type-1. This novel mechanism might be relevant during neuronal development, pruning and/or many of the mental disorders in which the number of synapses is affected.

Tecnologías verdes en zonas áridas: Diseño y evaluación energético-ambiental de sistemas de vegetación de aplicación en cubiertas edilicias Flores Asin, Juan Emiliano El trabajo de tesis doctoral aborda el estudio de cubiertas vegetadas en zonas áridas como alternativa tecnológica para incrementar las áreas verdes en medios construidos, atendiendo a que el enverdecimiento urbano constituye una estrategia viable en el marco del desarrollo sustentable. Sin embargo, su implementación impone desafíos derivados del establecimiento y permanencia de la vegetación a largo plazo dadas las fluctuaciones de temperatura diarias y estacionales, la limitada disponibilidad de agua, la exposición al viento, y la intensa radiación solar que pueden propiciar entornos hostiles para el crecimiento de las plantas. Dichas presiones tienen mayor impacto en regiones climáticas de alta vulnerabilidad ambiental, como es el caso de Mendoza - Argentina, debido a la ocurrencia de temperaturas extremas, bajos patrones de precipitación y, desuniforme distribución de las lluvias.En función de lo expuesto, la temática ha sido desarrollada en torno a dos ejes temáticos: a) Evaluación del comportamiento biológico de las especies que integran el paquete tecnológico a los fines de seleccionar especies vegetales apropiadas, de posible incorporación a los sistemas de naturación urbana y, b) Evaluación de la respuesta térmica de las cubiertas vegetadas a escala urbana y edilicia con el objeto de contribuir a disminuir las temperaturas urbanas y sus consecuentes impactos en la reducción de consumos de energía para alcanzar condiciones de confort en espacios interiores.Desde el punto de vista metodológico, la respuesta biológica de las especies fue evaluada mediante el análisis de la cobertura vegetal, conductancia estomática, consumo hídrico y su aporte en peso al sistema. Se realizaron ensayos experimentales en condiciones controladas, para un conjunto de 14 especies preseleccionadas en función de su aptitud teórica para integrar el paquete biológico de las cubiertas vegetadas en zonas áridas. La respuesta térmica fue evaluada en forma comparativa con cubiertas tradicionales en box de ensayos, en condiciones controladas y, mediante la predicción del comportamiento térmico de escenarios teóricos a escala edilicia y urbana. A tal fin se emplearon softwares de libre disponibilidad: EnergyPlus y ENVI-met.Los resultados obtenidos han demostrado una adaptación significativa al sistema de cultivo en cubiertas vegetadas de la especie exótica Aptenia cordifolia y dos especies nativas Hyalis argentea y Nassella tenuissima. Esto se debe a que alcanzaron coberturas vegetales superiores al 70%; respuesta positiva al riego en base a su administración de la apertura estomática y diferencias de temperatura de hoja; al aprovechamiento del agua de lluvia y al mínimo o intermedio consumo hídrico. Por último, desarrollaron un reducido peso adicional sobre la capacidad portante de las cubiertas. Desde el punto de vista térmico, los ensayos experimentales en prototipos a escala, mostraron que la incorporación de cubiertas vegetadas permite disminuir la temperatura media interior entre 2 y 3 ºC y la amplitud térmica entre 7 y 9 ºC, durante la estación cálida para zonas áridas. En consecuencia, se alcanza el objetivo propuesto respecto de lograr diseños de cubiertas vegetadas que sean eficientes en la mejora de las condiciones de habitabilidad térmica de los espacios interiores, bajo las condiciones climáticas imperantes. Por último, las simulaciones con EnergyPlus demostraron que la temperatura media interior del caso con cubierta tradicional aislada mejora la situación de base -cubierta sin aislar-, y esta mejora aumenta levemente con una cubierta vegetada con Aptenia cordifolia. Con respecto al ahorro energético, se alcanzan reducciones del orden del 50 % respecto al consumo del caso base con cubierta tradicional sin aislar, y de un 11 % respecto al caso base con cubierta aislada. Y, a escala urbana, el uso de cubiertas vegetadas respecto a cubiertas con membranas de aluminio ofrece disminuciones de temperatura en relación directa a la densidad constructiva, siendo más eficientes en entornos de alta densidad. De lo descripto se desprende que la incorporación de nuevas tecnologías verdes -cubiertas vegetadas- apropiadas a contextos urbanos de alta heliofanía y baja disponibilidad del recurso hídrico, constituye una estrategia de desarrollo urbano-edilicio sustentable, que contribuye a disminuir los consumos energéticos a escala edilicia, fortalecer las condiciones ambientales de las ciudades de zonas áridas, y mitigar el calentamiento global a escala macro.; This thesis addresses the study of roofs in arid regions as a technological alternative to increase green areas in built-up areas, taking into account that urban greening constitutes a viable strategy within the framework of sustainable development. However, its implementation imposes challenges derived from the establishment and permanence of vegetation in the long term given the daily and seasonal temperature fluctuations, the limited availability of water, the exposure to the wind, and the intense solar radiation that can cause hostile environments for the growth of the plants. These pressures have greater impact in climatic regions of high environmental vulnerability, as is the case of Mendoza - Argentina, due to the occurrence of extreme temperatures, low precipitation patterns and, uneven distribution of rainfall. Based on the above, the theme has been developed around two thematic axes: a) Evaluation of the biological behavior of the species that make up the technological package in order to select appropriate plant-species, of possible incorporation to the systems of urban nature and; b) Evaluation of green roofs thermal response at urban and building scale, in order to help reduce urban temperatures and their consequent impacts on the reduction of energy consumption to achieve comfort conditions in indoor spaces. Methodologically, the biological response of the plant-species was evaluated through the analysis of vegetation cover, stomatal conductance, water consumption and its contribution in weight to the system, in experimental tests under controlled conditions. Experimental tests were done under controlled conditions, for 14 preselected plantspecies according to their theoretical aptitude to integrate the biological package of green roofs in arid zones. The thermal response was evaluated comparatively with traditional roofs in test boxes, under controlled conditions. It also was predicted the thermal behavior of theoretical scenarios at the building and urban scale using freely available software: Energy Plus and ENVI-met. The results obtained have shown a significant adaptation to the growth media in green roofs, vegetated with the exotic species named Aptenia cordifolia and two native species, Hyalis argentea and Nassella tenuissima. This is due to the fact that they reached vegetable cover higher than 70%; positive response to irrigation based on their administration of the stomatal opening and leaf temperature differences; to the use of rainwater and to the minimum or intermediate water consumption; and, finally, to the reduced weight that they add to the carrying capacity of the roofs. From the thermal point of view, the experimental tests showed that the incorporation of green roofs allows reducing the average interior temperature between 2 and 3 ºC and the thermal amplitude between 7 and 9 ºC during the summer season for arid zones. Consequently, the proposed objective with respect to achieving designs of green roofs that are efficient in improving the thermal habitability conditions of the interior spaces, under the prevailing climatic conditions is reached. Finally, the simulations with EnergyPlus showed that the internal temperature of the case with traditional isolated cover improves the base situation - covered without isolating -, and this improvement increases slightly with a green roofs with Aptenia cordifolia. With respect to energy saving, reductions of around 50% are achieved with respect to the consumption of the base case with traditional uninsulated roof, and of 11% with respect to the base case with isolated roof. On the urban scale, the use of green roofs and the aluminum membrane roofs offers decreases in temperature in direct relation to the building density, being more efficient in high-density environments. From the above it is clear that the incorporation of new green technologies -green roofsappropriate to urban contexts with high heliophany and water resources shortage is a sustainable urban-development strategy, which contributes to reduce energy consumption at the building scale, strengthen the environmental conditions of cities in arid zones, and mitigate global warming on a macro scale.

Establishment of Babesia vulpes n. sp. (Apicomplexa: Babesiidae), a piroplasmid species pathogenic for domestic dogs Baneth, Gad; Cardoso, Luís; Brilhante Simões, Paula; Schnittger, Leonhard Background: Canine babesiosis is a severe disease caused by several Babesia spp. A number of names have been proposed for the canine-infecting piroplasmid pathogen initially named Theileria annae Zahler, Rinder, Schein & Gothe, 2000. It was shown to be a member of the Babesia (sensu lato) group infecting carnivores and is also closely related to the Babesia microti group. Subsequently, the same parasite species was reclassifed as a member of the genus Babesia and the name Babesia vulpes Baneth, Florin-Christensen, Cardoso & Schnittger, 2015 was proposed for it. However, both names do not meet the requirements of the International Code of Zoological Nomenclature (no accompanying descriptions, no deposition of type-specimens) and cannot be recognized as available names from the nomenclatural point of view. The purpose of this study was to further characterize this parasite in order to confrm its validity, to provide its description and to introduce zoological nomenclature for it with the name Babesia vulpes n. sp. Results: Morphological description of the parasite in canine erythrocytes demonstrated that it takes the shape of small (1.33×0.98 µm), round to oval forms reminiscent of the pyriform and ring shapes of other small canine Babesia spp., such as Babesia gibsoni Patton, 1910 and Babesia conradae Kjemtrup, Wainwright, Miller, Penzhorn & Carreno, 2006. However, these parasite forms were overall smaller than those measured for the latter two species and no tetrad (Maltese cross) form was reported. Furthermore, phylogenetic analysis using the cytochrome c oxidase subunit 1 (COX1) amino acid sequences substantiates the species identity of this parasite as previously demonstrated based on phylogenetic analysis of the 18S rRNA and β-tubulin genes. The holotype of the parasite species was designated and deposited in an accessible public collection. Conclusions: This study ratifes the name Babesia vulpes n. sp. proposed for the parasite previously referred to as Theileria annae Zahler, Rinder, Schein & Gothe, 2000, Babesia annae (Zahler, Rinder, Schein & Gothe, 2000) or Babesia vulpes Baneth, Florin-Christensen, Cardoso & Schnittger, 2015, or mentioned as “Babesia microti-like piroplasm”, “Babesia Span‑ ish dog isolate” and Babesia cf. microti.

Sistemas de protección social y bienestar juvenil, proyectos de gobierno y actores de la dinámica política local. Análisis comparado de los casos de Jesús María y Villa María, provincia de Córdoba (1999-2017) Pereyra, Eduardo Javier Desde los Estados locales se vienen implementando diferentes políticas públicas y desplegando distintos tipos de institucionalidad para abordar la cuestión juvenil de sus comunidades. Ahora bien, cabe preguntarse ¿cuáles son los rasgos más importantes del abordaje estatal sobre la juventud y lo juvenil a nivel local? ¿Qué características poseen los dispositivos institucionales para lo juvenil? La presente investigación asume como uno de sus principales desafíos comprender el conjunto de intervenciones que desarrollan los gobiernos locales para intervenir sobre la temática. Para ello se propuso la utilización de la categoría "sistemas de protección social y bienestar juvenil" dando cuenta de una manera esquemática las diversas producciones socio-estatales sobre la juventud y la cuestión juvenil que los gobiernos subnacionales locales realizan. Los casos concretos de análisis son los municipios de Villa María y Jesús María, de la Provincia de Córdoba. Para avanzar en este sentido se usa el método comparativo en combinación con una estrategia cualitativa de análisis, que implica, para cada caso seleccionado, la reconstrucción del proceso (process-tracing) del desarrollo histórico institucional de las políticas juveniles y de las estructuras del Estado a nivel local destinada a tales fines. Además de darle sistematización y una interpretación global al conjunto de intervenciones estatales, al proponerse un análisis comparado de los sistemas de protección social y juvenil, se sumaron nuevos interrogantes ¿Se observan regularidades entre las intervenciones de distintos gobiernos locales que puedan revelar diferencias institucionales y resultados distintos? ¿Cuáles serían los factores responsables de dicha variación? En este sentido, se partió del supuesto (siguiendo a Rodrigues-Silveira, 2010) que la variación interna de los sistemas de protección juvenil locales no resulta aleatoria y puede ser sistematizada en un conjunto de subtipos de sistemas teóricamente coherentes y mutuamente excluyentes. Se considera que en los municipios de Argentina existe una heterogeneidad institucional de las políticas sociales juveniles que es lo suficientemente importante como para generar diferencias cualitativas que justifiquen su clasificación en distintos tipos. Para ello, se creó una clasificación de tres "tipos ideales" de sistemas de protección social juvenil sobre la base de datos provenientes de fuentes secundarias relativos a los principales modelos de políticas sociales y juveniles que se han configurado históricamente en los diferentes ?Regímenes de Bienestar? de Latinoamérica y Argentina. Esto permite avanzar hacia una "teoría tipológica" que postule una vinculación entre estas configuraciones con lo que el trabajo propone como sus factores condicionantes, las cuales pasan a ser considerados como valores de una variable dependiente (Nazareno, 2009).Además, se procura avanzar en la identificación y comprensión de los factores que condicionan e influyen en las variaciones del abordaje institucional y las características de las políticas orientadas a los jóvenes. La investigación propone que el esquema interpretativo sobre la estructuración de los sistemas de protección social y bienestar juvenil a nivel local se encuentra condicionada por los posicionamientos que asume un proyecto de gobierno frente a la cuestión juvenil, la influencia que ejercen los actores de la dinámica política local y las mediaciones que las distintas unidades estatales realizan sobre las políticas juveniles mediante el despliegue de sus capacidades estatales.